豬帶絳蟲六鉤蚴TSOL18重組基因工程疫苗的研制.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本研究從孵化并激活的豬帶絳蟲六鉤蚴中提取總RNA，利用RT-PCR技術在國內(nèi)首次克隆了豬帶絳蟲六鉤蚴疫苗侯選基因TSOL18基因。選用近年來發(fā)展最快和最具潛能的真核表達系統(tǒng)-畢赤酵母，構建了重組表達載體pPIC9K-TSOL18，電轉化畢赤酵母菌種GS115，并用G418抗性梯度篩選法，獲得多拷貝重組菌株。對重組菌株用甲醇進行誘導表達，SDS-PAGE和Western-blot分析結果表明，誘導表達的培養(yǎng)上清中表達出大小為12ku和16

2、ku具有反應活性的重組蛋白?！　≡谪i帶絳蟲疫苗研究中，首次應用具有天然蛋白特性的真核表達產(chǎn)物進行動物保護試驗。將TSOL18重組抗原與206佐劑結合，制成豬囊蟲基因工程疫苗，對豬作了兩批免疫試驗?！　∮胮cDNA3.1/IFN-γ重組質粒作為豬囊蟲重組抗原免疫增強劑，抗體檢測結果沒有明顯升高，但免疫豬后淋巴細胞增殖非常明顯，并明顯增強了疫苗的保護效果，該組免疫豬減蟲率高達91％，與粗制抗原免疫組相同。而用pcDNA3.1/IL-4和

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