蓖麻磷脂酶C基因的克隆及其RNAi表達載體的構建.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、蓖麻是內蒙地區(qū)非常具有區(qū)域特色的世界十大油料作物之一。蓖麻油由脂肪酸組成，主要成分是蓖麻油酸。磷脂酶C在控制蓖麻油酸生物合成過程中起關鍵性的作用，它催化2-油?；蚜字纬?-?；?2-油?；视?，使非羥基脂肪酸進入三?；视?。通過基因工程手段設計并構建含有磷脂酶C基因的RNAi表達載體，以期在植物體內轉錄出含有部分磷脂酶C基因發(fā)夾結構的dsRNA，發(fā)揮干擾磷脂酶C基因表達的作用，從而提高總蓖麻油含量。
　　本試驗以通蓖5號蓖麻為

2、研究對象，提取其發(fā)育階段的種子總RNA，逆轉錄成cDNA，通過降落PCR得到長度分別為803bp和458bp的磷脂酶C基因片段C1和C2，采用Sanger雙脫氧鏈終止法對C1和C2進行測序，測序結果與Genbank中蓖麻磷脂酶C基因的mRNA進行同源性分析，同源性分別達到99.88％和99.13％，成功克隆了蓖麻磷脂酶C基因。并采用一步法成功構建了蓖麻磷脂酶C基因的RNAi表達載體，為通過RNAi干擾技術獲得總蓖麻油含量高的蓖麻新材料奠

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