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文檔簡介
1、香菇(Lentinula edodes)目前已是世界上產(chǎn)量僅次于雙孢蘑菇的人工栽培食用菌,是東亞地區(qū)最重要的食用菌之一。中國幅員遼闊,有著相當豐富的香菇自然種質(zhì)資源,這些自然種質(zhì)資源為香菇的遺傳育種提供了優(yōu)良材料。香菇大多數(shù)農(nóng)藝性狀和經(jīng)濟性狀表現(xiàn)為連續(xù)變異的數(shù)量性狀,受多基因控制,易受環(huán)境影響,采用常規(guī)育種方法很難對這些性狀進行改良。分子標記技術的發(fā)展為分子標記輔助育種提供了可能性。香菇QTL定位工作尚處于起步階段,存在亟待改進之處。以
2、連鎖不平衡為基礎的關聯(lián)分析方法為香菇數(shù)量性狀的遺傳研究提供了新的方法,也為香菇分子標記輔助育種研究提供了新的思路。
本研究以采集于全國14個省份的香菇93個野生菌株和1個栽培菌株為研究材料,利用篩選出的34對SSR分子標記,對群體進行全基因組分子掃描,分析我國野生香菇的遺傳多樣性及群體結構,利用基于連鎖不平衡的關聯(lián)分析方法,對香菇13個數(shù)量性狀與34個SSR分子標記的關聯(lián)性進行了研究。主要結果如下:
1.利用
3、34對SSR標記對94個香菇菌株進行遺傳多樣性、主成分分析(PCA)和群體結構分析。結果表明,34對引物共擴增出169條帶,其中多態(tài)性條帶為162條,多態(tài)性為95.9%。期望雜合度(He)、多態(tài)性信息含量(PIC)和Shannon信息指數(shù)平均值分別為0.44、0.4和0.89,表明我國香菇野生菌株存在較高的遺傳多樣性,可以作為關聯(lián)分析的材料。利用UPGMA聚類分析、主成分分析(PCA)和群體結構分析均可將94個菌株劃分為3個主要類群,三
4、者結果之間具有較高一致性。
2.對34對SSR標記位點形成的561個成對組合位點進行連鎖不平衡分析,共有150個位點組合存在一點程度的連鎖不平衡,占總位點組合數(shù)的26.74%,連鎖不平衡度都較低,大部分集中在0-0.2之間。基于r2統(tǒng)計概率P<0.01支持的不平衡組合位點數(shù)為67,占不平衡成對組合位點數(shù)的44.67%,占總位點組合數(shù)的11.94%,r2>0.2的組合位點數(shù)僅有3對,占總組合位點數(shù)的0.53%。
5、 3.利用TASEEL2.0軟件中的一般線性模型對34個SSR標記位點與13個性狀進行關聯(lián)分析,共檢測出6個與4個性狀顯著關聯(lián)的位點。其中與木屑培養(yǎng)基生長速度顯著關聯(lián)的位點有3個,分別為IS017、LEP2和X015,其變異解釋率分別為26.49%、16.59%和33.91%,總解釋率達到76.99%。位點LEN41與菌蓋直徑顯著關聯(lián),變異解釋率為17.04%。位點LTY1與菌蓋厚度顯著關聯(lián),變異解釋率為31.65%;位點F041與原基
6、期顯著相關聯(lián),變異解釋率為9.9%。
4.進一步分析與性狀顯著關聯(lián)位點的優(yōu)異等位變異,發(fā)掘出對農(nóng)藝性狀具有優(yōu)異等位變異的典型載體材料。結果表明,在與木屑培養(yǎng)基生長速度顯著關聯(lián)位點的等位變異中,X015-1增效表型效應最大;在與菌蓋直徑顯著關聯(lián)的等位變異中,LEN41-1增效表型效應最大;在與菌蓋厚度顯著關聯(lián)的等位變異中,LTY1-2增效表型效應最大;在與原基期顯著關聯(lián)的等位變異中,F(xiàn)041-1減效表型效應最大。本試驗研究結
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