酵母培養(yǎng)物對夏季生長育肥豬腸道微生物發(fā)酵和區(qū)系及機體免疫功能的影響.pdf

1、蘇南地區(qū)夏季的高溫高濕環(huán)境對生長育肥豬的健康生長是一個很大的挑戰(zhàn)，可能破壞胃腸道內正常微生物菌群的代謝平衡，并導致消化吸收和免疫系統(tǒng)出現(xiàn)某些功能性障礙。酵母培養(yǎng)物（Yeast Cultures，簡稱YC）是酵母細胞、發(fā)酵后培養(yǎng)基和酵母細胞代謝產物的混合物。YC含有的寡糖類、氨基酸、多肽、蛋白質、有機酸、維生素、酵母來源的酶和其他未知生長因子能夠作為腸道正常有益菌的主要底物.因此YC有可能調節(jié)胃腸道中微生態(tài)平衡，在一定程度上刺激機體的免疫

2、反應。本試驗旨在探討YC對夏季生長育肥豬腸道微生物發(fā)酵能力、微生物區(qū)系及相關免疫功能的影響。試驗分為三部分:
　　 一酵母培養(yǎng)物對夏季生長育肥豬回腸及結腸微生物發(fā)酵能力的影響
　　 豬腸道微生物發(fā)酵產生的VFA能被腸壁迅速吸收或利用，因此食糜VFA的水平可能不能準確評價VFA的產量。本試驗因此分別設計在體動物試驗和兩個批次的體外發(fā)酵試驗來研究日糧中添加酵母培養(yǎng)物(Yeast Culture，YC)對夏季生長育肥豬腸道微生

3、物發(fā)酵能力的影響.體內試驗選用180頭、70日齡、平均體重29.56±1.12kg的杜×長×大三元雜交商品豬，隨機分為3組，每組6個重復，每個重復10頭豬，對照組（C組）飼喂玉米-豆粕型基礎日糧，試驗1(T1)和試驗2(T2)組則在基礎日糧中分別添加1 g/kg· DM和4g/kg·DM的YC。試驗期共95天，分生長期(30kg～60kg)和育肥期(60kg～100 kg).分別在生長期末和育肥期末各組各重復隨機選取1頭豬進行屠宰取樣，

4、采集回腸和結腸食糜，分別用氣相色譜法和比色法測定食糜的揮發(fā)性脂肪酸（Volatile Fatty Acids，VFA）和乳酸濃度。體外試驗中，以上述回腸食糜為底物、結腸食糜為接種物，來模擬回腸食糜進入結腸后被微生物發(fā)酵產VFA的情況.試驗設計如下:(1)相同底物（C組回腸食糜）、不同接種物（C、T1、T2組結腸食糜）組合，以反映YC對結腸微生物發(fā)酵能力的影響;(2)不同底物（C、T1、T2組回腸食糜）、相同接種物（C組結腸食糜）組合，以

5、反映YC對回腸食糜可發(fā)酵能力的影響;(3)對應底物（C、T1、T2組回腸食糜）和對應接種物（C、T1、T2組結腸食糜），以綜合反映YC對腸道微生物發(fā)酵能力的影響.37℃下發(fā)酵24h后，測定VFA和乳酸濃度。體內試驗結果表明:日糧添加YC可在一定程度上改變回腸微生物的發(fā)酵產物組成，生長期T2組回腸食糜丙酸濃度顯著高于T1組(P＜0.05)，T2組丁酸濃度顯著低于對照組(P＜0.05)，T1組回腸食糜乳酸濃度顯著低于對照組（P＜0.05），

6、T2組回腸食糜的乳酸濃度極顯著低于對照組(P＜0.01);育肥期T1組回腸食糜乳酸濃度顯著低于對照組(P＜0.05)。YC對結腸食糜乳酸和VFA濃度沒有影響。體外發(fā)酵試驗的結果發(fā)現(xiàn):①YC有提高結腸微生物發(fā)酵回腸食糜產VFA能力的趨勢，生長期C-T1組產生的丁酸濃度顯著高于C-C組(P＜0.05);育肥期試驗組結腸微生物的發(fā)酵能力與對照組相比有升高趨勢，但差異不顯著(P＞0.05)。②YC顯著提高了回腸食糜的可發(fā)酵性，生長期T1-C組T

7、VFA濃度及其各組分均顯著高于C-C組（P＜0.01）;T2-C組乙酸、丁酸和總VFA濃度均顯著高于C-C組(P＜0.01);育肥期T1-C和T2-C組TVFA、乙、丙和丁酸濃度較對照組有升高趨勢，但差異不顯著（P＞0.05）.③從整體看YC顯著提高了生長期腸道微生物產丁酸的能力（P＜0.01），但對生長期TVFA和乙、丙酸濃度，及育肥期TVFA和各組成酸的濃度無顯著影響(P＞0.05)。綜合以上試驗結果:在夏季生長育肥豬日糧中添加YC

8、能顯著降低回腸乳酸濃度;同時顯著增強腸道微生物發(fā)酵產VFA的能力，尤其是產生丁酸的能力，從而有助于緩解持續(xù)高溫高濕環(huán)境對腸道微生態(tài)平衡的破壞。
　　 二酵母培養(yǎng)物對夏季生長育肥豬回腸及結腸微生物區(qū)系的影響
　　 本試驗以研究酵母培養(yǎng)物(YC)對夏季生長育肥豬腸道微生物區(qū)系結構和優(yōu)勢菌數(shù)量的影響為目的。試驗設計與分組、動物屠宰和回、結腸食糜樣品采集同試驗一的在體試驗。利用基于16S rRNA基因的PCR/DGGE技術探討回

9、、結腸菌群結構的變化，Real-time PCR技術測定回、結腸食糜總菌和乳酸桿菌數(shù)量，半定量PCR測定結腸丁酸產生菌的數(shù)量。結果表明，YC一定程度上改變了回、結腸菌群結構，添加YC組菌群相似性更高。YC對生長育肥豬回、結腸食糜總菌數(shù)量沒有影響，試驗組生長育肥豬回腸食糜中乳酸桿菌的數(shù)量較對照組顯著降低(P＜0.05)，而各組結腸食糜乳酸桿菌數(shù)量沒有顯著差異。YC提高了結腸丁酸產生菌的數(shù)量，但差異不顯著(P＞0.05)。由此可見，夏季生長

10、育肥豬日糧中添加YC，能夠提高回腸和結腸菌群結構相似性，顯著降低回腸乳酸桿菌的數(shù)量，在一定程度上提高結腸丁酸產生菌數(shù)量，與體外發(fā)酵試驗中YC降低回腸乳酸濃度，提高丁酸濃度的結果相一致，因而有利于菌群結構的穩(wěn)定，以緩解持續(xù)高溫高濕環(huán)境對腸道微生態(tài)平衡的破壞。
　　 三酵母培養(yǎng)物對夏季生長育肥豬機體免疫功能的影響
　　 本試驗旨在探討夏季日糧中添加酵母培養(yǎng)物對生長育肥豬免疫機能相關指標的影響。試驗動物與試驗設計同試驗一。生長

11、和育肥期末，從每欄中分別隨機選取一頭豬屠宰，稱胸腺、脾臟和肝臟重量，計算免疫器官指數(shù);采血并分離血清，用于測定IL-4、IFN-γ和PRRS抗體滴度;采集空腸組織和脾臟，勻漿后分別用于測定空腸SIgA、IL-4和IFN-γ濃度，及脾臟的IL-4和IFN-γ濃度。結果表明，生長期T2組空腸IFN-γ濃度較T1組顯著降低（P＜0.05）;T1組和T2組血清IFN-γ濃度均極顯著高于對照組(P＜0.01);T2組空腸IL-4濃度較對照組有降低

12、趨勢(P=0.07); T2組脾臟IL-4濃度顯著低于對照組（P＜0.05）;T1組和T2組血清IL-4濃度較對照組有升高趨勢（P=0.05）。育肥期T2組肝臟指數(shù)較比對照組顯著降低（P＜0.05）;T1組脾臟IFN-γ濃度顯著低于對照組(P＜0.05），T2組極顯著低于對照組(P＜0.01);T1組和T2組血清IL-4濃度均顯著高于對照組(P＜0.05)。以上結果表明，夏季生長育肥豬日糧中添加YC，在一定程度上增強了機體體液免疫和細胞