水稻抗病基因介導的抗病反應中蛋白質表達譜的比較分析.pdf

1、蛋白質組是一個基因組所表達蛋白質的總稱，研究內容包括蛋白質基本氨基酸序列的鑒定到相關性狀、修飾、功能及不同類型蛋白質分子相互作用等等。隨著蛋白質組概念的提出和定義，各種蛋白質表達分析技術目前已廣泛地應用在植物領域。水稻對人類的生存有著重要的社會經(jīng)濟意義，但各種水稻病害嚴重影響了水稻生產的發(fā)展。目前水稻基因組精細圖譜已得到全面解析，以雙向電泳和質譜分析為主的蛋白質組技術平臺也成功應用于對水稻各種組織器官在代謝和調節(jié)等方面的蛋白質組學研究。

2、 本研究建立了包括水稻葉片的蛋白質抽提、定量、雙向電泳、銀染、取點、酶解、電子噴霧電離質譜檢測和分析的試驗體系，提出了一套與質譜兼容的蛋白質雙向電泳銀染方案。并采用雙向電泳一質譜分析技術，比較分析了水稻在接種各種白葉枯病菌(Xanthomonasoryzaepvoryzae)后蛋白質表達譜的差異。在接種后1h、4h、8h、24h、72h分別取樣。通過比較接種白葉枯病菌和對照之間、接種不同白葉枯病菌生理小種之間的表達差異，鑒定了7

3、2個差異表達的抗病相關蛋白質位點，對其中部分位點的蛋白質進行了電離子噴霧二級質譜學分析鑒定，確定了包括RNA結合蛋白、琥珀酰輔酶A連接酶α亞基、1，5-二磷酸核酮糖羧化酶/氧化酶、非頂端分生組織蛋白、葉片衰老相關類蛋白、碳酸酐酶、轉導素家族蛋白/WD-40重復家族蛋白、乙酰乳酸合成酶、3-磷酸甘油醛脫氫酶B亞基、細胞基質3-磷酸甘油醛脫氫酶的11個抗病反應中差異表達的蛋白質。本研究鑒定出的差異表達蛋白質為在蛋白質水平上研究水稻抗病反應機