轉基因后代豬pGH基因差異表達的研究.pdf

1、為探討生長激素在轉基因豬后代體內的表達量及其與生長性能的相關性，同時為節(jié)糧型高瘦肉率轉基因豬品種的培育奠定科學基礎，本研究針對用精子介導納米基因裁體法制備的F0代母豬與非轉基因公豬配種所產的16頭F1代仔豬，經PCR擴增、克隆測序后確定轉基因陽性率。分別提取耳組織和血液中總RNA，RT-PCR，進行實時熒光定量PCR。根據RT-PCR中確定的試驗所需內參基因，結合30日齡、90日齡、150日齡樣品和內參樣品所得的擴增曲線和熔解曲線圖譜，

2、分析16個樣品不同生長階段的總熒光強度，峰值特異性及組織差異性，確定豬生長激素基因在轉基因豬和非轉基因豬體內的表達量差異。測量統(tǒng)計16頭后代豬的30日齡、90日齡、150日齡體重，通過獨立樣本T檢驗和個體日增重的分析，經校正后與第一階段所得pGH基因在豬體內的不同表達水平進行關聯(lián)。結論如下:
　　 1.F1代仔豬中有7頭為轉基因豬，9頭為非轉基因豬。
　　 2.同期耳組織中的pGH表達量低于血液中pGH表達量.
　

3、　 3.F1代豬的pGH基因平均表達量在兩組待測豬群中呈現(xiàn)明顯不同。30日齡時轉基因組pGH表達量低于非轉基因組;90日齡時，雖然轉基因組高于非轉基因組pGH表達量，但差異不明顯;150日齡時，轉基因組pGH表達量明顯高于非轉基因組。
　　 4.F1代轉基因豬的平均日增重在30日齡之內低于非轉基因豬17.8372g，90日齡時，已超過非轉基因豬，90日齡到150日齡之間，持續(xù)優(yōu)勢生長速度.
　　 5.熒光定量PCR所得