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文檔簡介
1、本研究克隆了煙草誘導型啟動子hsr203J及花生幾丁質酶基因（Ah-chi）全長cDNA序列。將hsr203J替換掉pCAMBIA1301上的CaMV35S啟動子，用Ah-chi替換掉pCAMBIA1301上的GUS基因，構建了hsr203J啟動子驅動的Ah-chi的植物表達載體。分別通過農桿菌介導法和花粉管注射法轉化花生，獲得了轉基因植株，PCR擴增結果表明hsr203J及Ah-chi均已成功導入到花生中。主要研究結果如下:
2、 1.從煙草中克隆得到病原物誘導型啟動子hsr203J，該片段大小為1153bp，與GenBank中已注冊的序列（序列號:X77136）同源性為99.83％，雖有3個堿基的突變，但突變均未發(fā)生在啟動子序列的關鍵調控活性區(qū)域。
2.提取花生葉片總RNA，根據GenBank中已注冊的序列（序列號:X82330）設計特異引物擴增得到花生幾丁質酶基因全長cDNA，經測序分析知該片段長899bp，與GenBank中已注冊序列同源
3、性為100％，該序列已在GenBank上登記(HQ439775)。
3.將hsr203J替換掉pCAMBIA1301上的CaMV35S啟動子，用Ah-chi替換掉pCAMBIA1301上的GUS基因，分別成功構建了植物表達載體pCAMBIA1301-hsr203J、pCAMBIA1301-Chi和pCAMBIA1301-hsr203J-Chi。
4.用農桿菌介導法和花粉管注射法將各表達載體轉化花生，均獲得了分
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