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文檔簡介
1、植物病毒侵染植物體后,植物將啟動轉錄后基因沉默(PTGS,post-transcriptionalgenesilencing)機制,通過沉默病毒的某些功能基因抵制病毒浸染。根據(jù)植物的這種防御機制,可利用植物病毒構建基因沉默載體,用攜帶來源于植物的目標基因片段的病毒載體侵染植物,隨著PTGS的啟動可以使目標基因發(fā)生沉默,根據(jù)植物表型變化可推測目標基因的功能,這種利用病毒載體來沉默植物基因的方法被稱為病毒誘導的基因沉默(VlGS,virus
2、-induced gene silencing)。
我們利用由煙草脆裂病毒(TRV)構建而來的病毒載體,在番茄中成功沉默VIGS報告基因-八氫番茄紅素脫氫酶(PDS)基因,使番茄葉片表現(xiàn)白化現(xiàn)象,從而成功構建了番茄VIGS體系,為大規(guī)模番茄基因功能分析提供了技術平臺。另外,還對獲得較好VIGS效果的番茄生長條件進行了探索。
番茄白粉病(Oidium neolycopersici)是一種世界性植物病害,由活體寄
3、生真菌番茄白粉病菌引起,在番茄(Solanum lycopersicum)的整個生育期間均可發(fā)生,流行時間長,蔓延速度快,嚴重影響番茄的生產(chǎn)。目前對番茄白粉病的防治主要是利用殺菌劑,導致生產(chǎn)成本增加和環(huán)境污染。利用轉基因技術培育抗性品種是防治番茄白粉病的最佳途徑之一,因此,鑒定番茄白粉病抗性反應關鍵基因顯得尤為重要。
我們以前利用cDNA-AFLP技術和電子作圖,確定了一個功能未知的番茄白粉病抗性反應關鍵基因的候選基因DL
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