載脂蛋白B對脂肪肝體外模型的調控研究.pdf

1、載脂蛋白(Apolipoprotein，Apo)是在分子量、免疫性及代謝上具有多態(tài)性的蛋白質，是受體結合的識別標志，參與脂蛋白與細胞表面脂蛋白受體的結合及其代謝過程，在脂質代謝的過程中起著極為重要的作用。本文通過體外試驗，探討了載脂蛋白在脂質代謝的過程中的作用機理。
　　 采用膠原酶兩步灌流法獲取大鼠原代肝細胞，用不同濃度的DL-乙硫氨酸處理24～48h，檢測肝細胞培養(yǎng)基中ALT，AST濃度和肝細胞中TG，apoAⅠ，apoB，

2、LDL與HDL的濃度。采用油紅O染色觀察處理后肝細胞內脂肪滴變化情況。結果顯示：每只大鼠可獲得(2～4)×108個肝細胞，成活率在95％左右，培養(yǎng)的肝細胞形態(tài)完整、生長良好，可用于脂質代謝的研究。肝細胞被處理后，隨著DL-乙硫氨酸濃度的增大，ALT，AST含量升高，并且隨著時間延長而升高；TG的含量增大，相同濃度梯度下,24h比48h含量高；ApoAⅠ的含量增大，處理24h時，模型組各組與對照組有極顯著差異（P<0.01）,24h與48

3、h含量沒有太大變化；apoB的含量減小，處理24h,48h后,2.0,3.0,4.0，5.0mmol/L模型組與對照組都有極顯著差異（P<0.01）；LDL，HDL的含量增大，處理24h,48h后,2.0,3.0,4.0，5.0mmol/L模型組與對照組有極顯著差異（P<0.01）。油紅O染色后光鏡下顯示，細胞胞漿內出現(xiàn)明顯的脂質堆積，橘紅色脂滴數(shù)量逐漸增多，有的地方染色后聚結成片，胞核圓形，藍染，有的細胞膜邊緣已不完整，符合肝細胞脂變

4、形態(tài)特征，與對照組比較有顯著差異（0.01　　 通過以上試驗，選用2.0mmol/LDL-乙硫氨酸處理大鼠原代肝細胞24h，制備脂肪肝體外模型。不同劑量的澤瀉粗提物作用于該模型，用上述測定方法，比較TG，apoB 與LDL濃度的變化，探求載脂蛋白在脂質代謝過程中的作用機理。結果顯示：添加澤瀉的各組TG含量明顯降低，apoB含量升高，LDL 含量降低,24h比48h時效果顯著。澤瀉粗提物的各濃度中，以5.0μg