特異氨基酸位點(diǎn)對(duì)Cry6Aa2殺蟲功能的影響.pdf

1、蘇云金芽孢桿菌(Bacillus thuringiensis，簡(jiǎn)稱Bt)是目前世界上應(yīng)用范圍最廣的微生物殺蟲劑。不同的Bt菌株產(chǎn)生的ICPs對(duì)鱗翅目、鞘翅目、膜翅目、雙翅目和線蟲有高度的、特異的毒性。
　　 近來發(fā)現(xiàn)兩種Bt晶體蛋白亞家族，Cry5和Cry6含有殺線蟲的毒素。Cry6A與CrySB和其他Bt家族成員間沒有序列相似性，在結(jié)構(gòu)上可能有很大的不同。此外，對(duì)Cry5B有抗性的秀麗線蟲突變體對(duì)Cry6A仍然敏感，說明Cry

2、6A與Cry5B有不同的毒性機(jī)理。雖然Cry6A對(duì)多種線蟲同樣有毒性，并且在控制線蟲病害方面有潛在的價(jià)值，但是Cry6A的作用機(jī)制仍然不清楚。
　　 本文主要研究了Cry6Aa2蛋白潛在的二硫鍵和跨膜區(qū)的功能。
　　 cry6Aa2已被克隆并提交到GenBank。氨基酸序列分析發(fā)現(xiàn)其存在五個(gè)半胱氨酸，分別位于aa88、aa162、aa402、aa404、aa451，在aa253和aa271之間存在一個(gè)跨膜區(qū)。為了研究Cr

3、y6A的作用機(jī)制，構(gòu)建了幾個(gè)突變體，包括C88G、C162G、C88G&C162G、C402G&C451G、C404G&C451G、L259P&L260P和E266P。研究了不同的突變對(duì)Cry6Aa2蛋白在細(xì)胞內(nèi)分布的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：
　　 1.C402G&C451G、C404G&C451G突變子殺線蟲的生物活性顯著升高，C88G&C162G突變子殺線蟲的生物活性顯著降低，L259P&L260P、E266P突變子的殺線蟲生物活性