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文檔簡介
1、研究背景:
傳統(tǒng)突觸質膜分離純化方法存在細胞器污染、腦組織樣本需求量較多等問題,用于微小腦區(qū)突觸質膜蛋白質組學研究的樣品制備方法仍需發(fā)展。
目的:
我們提出新的整合方法,旨在富集微小腦組織中的突觸質膜蛋白質,由此開展有效的突觸質膜蛋白質組學分析。
方法:
我們提出了一種新的樣品制備方法,即將基于生物素標記的細胞表面蛋白的親和捕獲、突觸體分離和突觸質膜蛋白的生化提取進行有效整合。通過免疫印
2、跡分析初步評估方法有效性后,采用質譜和生物信息學技術對突觸質膜蛋白富集組分進行分析。
結果:
我們通過突觸蛋白標志物的免疫印跡分析初步證實了這種整合方法的有效性。通過突觸質膜蛋白富集組分的質譜和生物信息學分析,241個突觸質膜蛋白被鑒定,包括85個已報道的經典突觸質膜蛋白和156個目前尚未報道的非經典突觸質膜蛋白(但同時具有質膜和突觸定位)。進一步分析表明這兩類蛋白質在理化性質和功能方面有很多相似之處。通過STRIN
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