以11H苯[a]咔唑為母體新型熒光試劑的制備及在高效液相色譜中應用研究.pdf

1、高效液相色譜(HPLC)因其強大的分離分析能力已被廣泛應用于化學、生物化學、臨床醫(yī)學、藥物學、神經(jīng)生物學及食品衛(wèi)生、環(huán)保檢測、質(zhì)量控制等許多研究和應用領域。然而，由于樣品中被測組分本身性質(zhì)及其低含量的限制，并非所有化合物都可直接用于液相色譜分析。熒光檢測具有很高的靈敏度，利用熒光標記技術使本身不發(fā)熒光的化合物(如脂肪酸、脂肪胺、氨基酸等)轉(zhuǎn)化成發(fā)射熒光的衍生物，從而實現(xiàn)高靈敏熒光檢測。本文重點研究了幾種以11H-苯[a]咔唑為母體熒光標

2、記試劑的合成和表征，考察了熒光標記試劑的光譜性質(zhì)，優(yōu)化了衍生反應條件、色譜分離條件，并將建立的方法應用于不同實際樣品的分析中。具體工作內(nèi)容如下： 第一章：介紹了熒光原理及熒光標記法。簡述了高效液相色譜的發(fā)展及其基礎知識。分析總結了熒光試劑衍生法的研究概況。 第二章：三種熒光標記試劑： 2-(11H-苯[a]咔唑)乙基氯甲酸酯(BCEC-C1)、2-(11H-苯[a]咔唑)乙基對甲苯磺酸酯(BCETS)、2-(11H-苯[

3、a]咔唑)異丙基基氯甲酸酯(BCPC-C1)的設計合成、結構表征和光譜性質(zhì)研究。 第三章：兩種熒光標記試劑BCEC-C1和BCPC-C1分別用于脂肪胺的高效液相色譜．質(zhì)譜分析。通過對衍生化條件和色譜分離條件的優(yōu)化，建立了脂肪胺的柱前衍生化高效液相色譜熒光檢測法，并將方法應用于蝦醬等實際樣品的測定。結果表明，衍生反應條件溫和，衍生產(chǎn)率高，該方法的線性范圍寬，重現(xiàn)性好，靈敏度高。 第四章：2-(11H-苯[a]咔唑)乙基氯

4、甲酸酯(BCEC-C1)用于氨基酸的高效液相色譜．質(zhì)譜分析。建立了BCEC-C1熒光標記液相色譜分析法，實現(xiàn)了氨基酸類標記，采用二十種氨基酸的BCEC-C1柱前衍生熒光檢測法實現(xiàn)了牛血清白蛋白和油菜蜂花粉中氨基酸的測定。 第五章：熒光標記試劑BCETS用于脂肪酸的高效液相色譜．質(zhì)譜分析。通過對衍生化條件和色譜分離條件的優(yōu)化，建立了脂肪酸的柱前衍生化高效液相色譜熒光檢測法，并將方法應用于土壤、苔蘚樣品的測定，實現(xiàn)了這些樣品中脂肪酸