N-連接蛋白質糖基化分析用微流控芯片平臺和方法研究.pdf

1、蛋白質糖基化在許多生物和生理過程中發(fā)揮著重要的作用,進行蛋白質糖基化的分析在蛋白質組學以及藥物篩選的研究中具有重要的意義.本論文分別以寡糖鏈、糖肽以及整個糖蛋白(糖形)為分析對象,進行以微流控芯片和質譜或者二者聯(lián)用為基礎的 N-連接蛋白質糖基化分析平臺和方法的研究.主要內容包括: 在微流控芯片上實現(xiàn)了簡單糖的快速電泳分離和直接、間接激光誘導熒光檢測；發(fā)展了以芯片電泳與外切糖苷酶酶解結合,激光誘導熒光檢測為基礎,以糖肽為分析對象的

2、糖鏈結構類型分析方法,對火雞卵白蛋白的糖鏈結構進行推測,結果表明該蛋白含有高甘露糖型和雜合型的糖鏈；設計并制備了一種集成化凝集素親和微流控芯片.在通道內構建以整體材料為載體的微米級的凝集素親和柱,以電滲流為驅動力,在微流控芯片上實現(xiàn)了傳統(tǒng)凝集素親和色譜的全過程,用豌豆凝集素親和芯片對糖蛋白的糖形進行分析,根據(jù)其糖鏈與豌豆凝集素結合能力的不同將糖形分為與該凝集素不結合、弱結合和強結合的組分.該芯片具有耗樣量少、分析快速以及操作簡單的優(yōu)點.