簡介：懸浮力學狀態(tài)通過誘導(dǎo)整合素Β1表達上調(diào)促進乳腺腫瘤細胞的外滲重慶大學碩士學位論文學術(shù)學位學生姓名張瑩指導(dǎo)教師張兵兵講師呂永鋼教授專業(yè)生物學學科門類理學重慶大學生物工程學院二O一七年四月重慶大學碩士學位論文中文摘要I摘要腫瘤轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤的重要生物學特征，大多數(shù)腫瘤患者并非死于原發(fā)性癌而是死于轉(zhuǎn)移性癌。近年來，針對循環(huán)腫瘤細胞CIRCULATINGTUMORCELLS,CTCS外滲機制的研究已成為抑制腫瘤轉(zhuǎn)移的新熱點。本課題采用懸浮培養(yǎng)的方法模擬CTCS在血液循環(huán)系統(tǒng)中的懸浮力學狀態(tài)，探討懸浮力學狀態(tài)對乳腺腫瘤細胞與內(nèi)皮細胞之間相互作用的影響，重點考察了細胞粘附分子CELLADHESIONMOLECULES,CAMS整合素Β1INTEGRINΒ1在該過程中所扮演的角色。主要研究工作和實驗結(jié)果如下①懸浮培養(yǎng)促進懸浮培養(yǎng)促進乳腺腫瘤乳腺腫瘤細胞細胞的外滲的外滲通過流動腔粘附實驗和TRANSWELL細胞遷移實驗檢測貼壁組和懸浮組MDAMB231乳腺腫瘤細胞在內(nèi)皮細胞層的粘附能力、鋪展能力及跨內(nèi)皮遷移能力。流動腔粘附實驗結(jié)果表明經(jīng)懸浮培養(yǎng)1天或3天的MDAMB231細胞，其在內(nèi)皮細胞層的粘附能力顯著強于貼壁組P005，懸浮培養(yǎng)1天和3天之間無顯著性差異。利用軟件IMAGEJ對乳腺腫瘤細胞的鋪展形態(tài)進行統(tǒng)計分析，結(jié)果表明在相同共孵育時間下，懸浮組MDAMB231細胞在內(nèi)皮細胞層的鋪展面積顯著大于貼壁組P001；共孵育6小時，懸浮組MDAMB231細胞圓度顯著小于貼壁組。TRANSWELL細胞遷移實驗結(jié)果表明懸浮組MDAMB231細胞發(fā)生跨內(nèi)皮遷移的細胞數(shù)量顯著多于貼壁組P001。②懸浮力學狀態(tài)誘導(dǎo)整合素懸浮力學狀態(tài)誘導(dǎo)整合素Β1高表達高表達通過QPCR和免疫印跡法檢測貼壁組和懸浮組MDAMB231細胞整合素Β1的表達水平。實驗結(jié)果表明懸浮培養(yǎng)使得整合素Β1在基因水平的表達量提高了235±058倍P005，在蛋白水平的表達量提高了217±040倍P001。通過SIRNA技術(shù)對整合素Β1進行敲低處理，QPCR結(jié)果表明貼壁組MDAMB231細胞的整合素Β1在基因水平上降低了62貼壁對照組化1處理，P001，敲低效果極顯著；懸浮組MDAMB231細胞的整合素Β1在基因水平上降低了74P001，敲低效果極顯著。免疫印跡法結(jié)果表明整合素Β1敲低處理后，貼壁組MDAMB231細胞的整合素Β1在蛋達水平上降低了39貼壁對照組化1處理，P001，敲低效果極顯著；懸浮組MDAMB231細胞的整合素Β1在蛋白水平上降低了80P001，敲低效果極顯著。③整合素整合素Β1對乳腺腫瘤細胞外滲的對乳腺腫瘤細胞外滲的影響影響設(shè)置貼壁對照組ADCTRL、貼壁整合素Β1敲低組ADITGB1、懸浮對照組SUSPCTRL、懸浮整合素Β1敲低組SUSPITGB1，通過流動腔粘附實驗、鋪展實驗

簡介：目前，在女性的癌癥死亡病例當中，乳腺癌占有很大的比例，其較高的死亡率主要是因為乳腺癌細胞擁有較高的轉(zhuǎn)移性。據(jù)報道，90％以上的乳腺癌患者晚期都會發(fā)生腫瘤轉(zhuǎn)移，最常見的是肺部轉(zhuǎn)移。因此在治療乳腺癌時有效地抑制腫瘤細胞轉(zhuǎn)移就顯得意義重大。本文采用的方案是構(gòu)建一種高分子納米載藥系統(tǒng)對抗癌藥物進行包載，實現(xiàn)藥物對腫瘤原發(fā)部位和轉(zhuǎn)移灶的靶向治療。在實驗開始階段我們建立了高效液相色譜法對卡巴他賽進行體外分析。通過全波長掃描我們選定了最適合的檢測波長230NM查閱文獻并經(jīng)過實際實驗摸索確定最終的液相色譜條件；該檢測方法專屬性良好，輔料的引入不會對峰形和峰位產(chǎn)生干擾；在不同的藥物濃度條件下的回收率均在955之間，表明了輔料同樣不會影響藥物含量的測定；在1ΜGML400ΜGML藥物濃度范圍內(nèi)，藥物濃度與液相色譜峰面積存在良好的線性相關(guān)，相關(guān)系數(shù)R2099991日間進樣和日內(nèi)進樣結(jié)果的精密度都達到方法學要求，RSD值均小于2，表明測定方法穩(wěn)定；藥物含量測定結(jié)果與標示的理論濃度比值在99362784之間，測量準確度較高。通過眾多的方法學驗證性實驗證明了所建立的高效液相色譜法體外分析卡巴他賽的可行性良好。選用聚乙二醇PEG進行修飾的聚己內(nèi)酯（PCLPCL6500PEG5000做為載體材料，采用薄膜水化超聲法對抗癌藥卡巴他賽（CABAZITAXEL進行了包載，形成載藥納米膠束（PCM。在體外對納米膠束的粒徑、電位、形態(tài)、包封率、載藥量、釋藥行為、血液中的分散穩(wěn)定性進行考察。結(jié)果顯示制備的PCM表面圓整均一，在水溶液中的強度平均粒徑5013±1196NM，分布PDI為0256，帶有負電荷（203±012MV對藥物卡巴他賽的包封率高達97，表明模型藥物能夠被載體系統(tǒng)很好地包載將PCM分散在PH74緩沖鹽中，隨時間變化，粒徑在24H內(nèi)變化不超過24NM；對分散在PH74和PH50兩種PBS的納米聚合物膠束的包封率按時間點進行測定，結(jié)果顯示包封率并未隨時間改變，均在97左右，說明藥物能夠在血液循環(huán)系統(tǒng)中穩(wěn)定存在而不會提前將藥物泄漏。選用高轉(zhuǎn)移性的4T1乳腺癌細胞作為用藥對象，分別考察了載藥納米膠束和卡巴他賽注射液對細胞毒性、細胞攝取和腫瘤細胞侵襲迀移能力的影響。結(jié)果表明腫瘤細胞能夠?qū){米聚合物膠束大量攝取，共定位結(jié)果顯示富集在細胞質(zhì)中。在極低的藥物濃度（10NGML下，腫瘤細胞的侵襲和迀移活動就能被很好地抑制，卡巴他賽注射液組的細胞只有925迀移到TRANSWELL膜的另一面和891的侵襲抑制，而PCM抑制了91以上的細胞迀移和90的細胞侵襲。表明了PCM能夠?qū)θ橄侔┘毎霓D(zhuǎn)移產(chǎn)生顯著的抑制效果。同時，細胞毒性結(jié)果顯示了在10NGML濃度下，細胞存活率在80以上，細胞能夠正常生長。本文在NUNU裸鼠身上種植高轉(zhuǎn)移性乳腺癌4T1細胞構(gòu)建了乳腺癌皮下瘤模型，用以評價納米聚合物膠束在體內(nèi)的分布和PCM對乳腺癌生長和轉(zhuǎn)移的抑制效果。體內(nèi)實驗結(jié)果表明隨時間推移，PCM能在腫瘤處大量富集，8H最大，隨后被代謝。離體結(jié)果顯示納米膠束在腫瘤分布顯著高于其他器官，其次是在肺部有聚集。與生理鹽水組比較，注射液組（CTX和PCM都能對腫瘤的生長產(chǎn)生顯著性的抑制，分別只有對照組腫瘤大小的355±62和258±58。載藥納米膠束組抑制效果略優(yōu)于普通注射液。肺轉(zhuǎn)移結(jié)果顯示普通卡巴他賽注射液有86左右的轉(zhuǎn)移抑制率，如果對藥物進行高分子聚合物包載后轉(zhuǎn)移抑制效果得到更進一步的提升。上述結(jié)果表明廣泛應(yīng)用于治療前列腺癌的藥物一卡巴他賽能夠?qū)θ橄侔┑纳L和肺部轉(zhuǎn)移產(chǎn)生顯著性的抑制效果。同時若對藥物利用高分子聚合PCL6500PEG5000進行包載形成納米膠束后，對乳腺癌的生長和轉(zhuǎn)移抑制能力都得到進一步的提升。本研究拓寬了卡巴他賽的臨床應(yīng)用范圍，也對乳腺癌的治療進行了一次新的探索。

簡介：背景乳腺癌影響婦女身心健康，嚴重時危及生命，在我國女性惡性腫瘤中排在首位。在全球范圍內(nèi)，我國占據(jù)每年新診斷乳腺癌病例約122％，死亡病例約96?；蛲蛔兒透邼舛燃に氐鹊拈L期作用是乳腺癌產(chǎn)生的高危因素，對于有著高危因素的患者可以給予預(yù)防性的雙側(cè)“乳腺切除術(shù)”或“卵巢切除”，因手術(shù)存在很多的副作用，實行手術(shù)前應(yīng)考慮全面，權(quán)衡利弊。乳腺癌除了手術(shù)治療外，還有新輔助治療和輔助治療。各種治療的綜合運用，使乳腺癌的臨床療效有了明顯的提高。乳腺癌的分子分型及其指導(dǎo)下的分類治療，以及精準醫(yī)學是當今研究熱點。乳腺癌的發(fā)生發(fā)展除了基因突變這個因素外，表觀修飾也日益受到關(guān)注。乙?；腿ヒ阴；潜碛^修飾里非常重要的修飾方式。組蛋白乙?；腿ヒ阴；綄τ谡婧思毎娜旧|(zhì)的重組和基因的表達有著重要的影響，組蛋白乙?；D(zhuǎn)移酶HAT和組蛋白去乙酰化酶HDAC相互制約，負責調(diào)節(jié)核心組蛋白乙?；腿ヒ阴；膭討B(tài)平衡組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶和組蛋白去乙酰化酶的調(diào)節(jié)失去平衡時，會導(dǎo)致基因轉(zhuǎn)錄改變，促進腫瘤的發(fā)生。組蛋白去乙酰化酶通過使組蛋白去乙?；孌NA更緊地纏繞在組蛋白上，從而導(dǎo)致這些DNA不易被基因轉(zhuǎn)錄因子接觸，影響與細胞增值、周期、凋亡等有關(guān)的蛋白的表達，導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生與發(fā)展，所以近年來組蛋白去乙?；钢饾u成為抗腫瘤藥研究的新靶點各種組蛋白去乙?；敢种苿℉DACI）在癌癥的表觀修飾方面的作用已逐漸被發(fā)現(xiàn)，但具體機制有待進一步研究，中國自主研發(fā)的HDACI類藥物西達本胺在機制研究方面還相對偏少，尤其在乳腺癌上的作用機制還尚不清楚。目的組蛋白去乙?；敢种苿┦且环N新型的抗癌藥物，能夠抑制腫瘤的生長，阻滯細胞周期和促進細胞凋亡。一個非常重要的口服HDACI類藥物西達本胺（CHIDAE），單藥或聯(lián)合在淋巴造血系統(tǒng)腫瘤或固體瘤中使用，都表現(xiàn)出了很好的抗腫瘤作用，在較多的腫瘤中都具有明顯的周期阻滯和促進凋亡的作用，但詳細的分子機制還不是特別清楚。本實驗觀察西達本胺體外對乳腺癌MCF7和MDAMB453細胞增殖、形態(tài)、凋亡和周期的影響，并研究其可能的抗腫瘤作用機制。方法在96孔板上按照5X103個孔種板，待細胞貼壁后用西達本胺（0、20、40、60、80、100ΜMOLL）對MCF7和MDAMB453細胞分別處理24、48、72小時，用7SEACCK對細胞的增殖情況進行評估，計算細胞被抑制的情況。在6孔板上按照3X105個孔種板，待細胞貼壁后用西達本胺（0、20、40、80ΜMOLL）對MCF7和MDAMB453細胞分別處理48小時，收集處理后的細胞至流式管，并加入DNA染色液（STAININGSOLUTION）和滲透液（PERMEABILIZATIONSOLUTION），混勻后避光孵育30分鐘，上流式細胞儀檢測細胞周期分布；用相同的方法收集細胞至流式管后，加入BINDINGBUFFER、FITCANNEXIN和PI，混勻后避光孵育15分鐘，上流式細胞儀檢測細胞凋亡率。將6孔板上經(jīng)過西達本胺（0、20、40、80ΜMOLL）處理48小時的細胞用細胞刮收集到EP管，用裂解液提取蛋白，并用BCA測蛋白濃度。通過跑電泳將目的蛋白與其他蛋白分離開來，經(jīng)過轉(zhuǎn)膜將蛋白轉(zhuǎn)移至PVDF膜上，孵一抗和二抗，再通過顯影劑使目的蛋白顯影。先用PRIMERPREMIER軟件設(shè)計引物，由專門公司合成。使用TRIZOL提取總MRNA，通過逆轉(zhuǎn)錄試劑盒將MRNA逆轉(zhuǎn)為CDNA，再用實時熒光定量PCR儀檢測CT值，用2ΔΔCT計算分析結(jié)果。結(jié)果經(jīng)西達本胺（0，20，40，80，100ΜM）處理的MCF7和MDAMB453細胞增殖均被抑制，呈一定的時間和濃度依賴性，在24小時時抑制作用較弱，抑制率都在25以下；當較高濃度西達本胺作用48或72小時，MDAMB453和MCF7細胞一樣，抑制率都為90左右。西達本胺作用于乳腺癌細胞后，細胞邊緣變得不規(guī)則，細胞碎片增多，并出現(xiàn)大量的懸浮細胞。2種乳腺癌細胞經(jīng)西達本胺（濃度分別為0、20、40和80ΜMOLL）處理48小時后，隨著藥物濃度的提高，MCF7和MDAMB453細胞的凋亡率逐漸增加，分別從36±104升至3303±575和307±064升至266±66；細胞周期分布中G2M期也增加的非常明顯，分別從1345±573升至2745±844和1895±148升至344±1467。實時熒光定量PCR和WESTERNBLOT提示西達本胺可明顯下調(diào)兩種乳腺癌細胞BCL2、PROCASPASE3、PROPARP和CYCLINB2的表達水平，上調(diào)BAX、P21和CLEAVEDPARP的表達水平。結(jié)論西達本胺作為新的HDACI類藥物可能通過誘導(dǎo)MCF7和MDAMB453細胞凋亡和使細胞阻滯在G2M期發(fā)揮體外抗乳腺癌細胞增殖的作用，其作用機制可能涉及對BAX、P21、BCL2、CLEAVEDPARP、PROCASPASE3、PROPARP和CYCLINB2表達的調(diào)控。

簡介：目的應(yīng)用LOGISTIC回歸模型探討乳腺影像報告數(shù)據(jù)系統(tǒng)BIRADS中的超聲診斷指標在乳腺腫塊良、惡性鑒別中的應(yīng)用價值，基于此建立乳腺超聲影像報告數(shù)據(jù)系統(tǒng)分類（3～5類）評分系統(tǒng)，并對各乳腺腫塊評分并分類，旨在為超聲醫(yī)師提供客觀有效的評估分類標準。方法回顧分析在安徽醫(yī)科大學第二附屬醫(yī)院行乳腺超聲檢查的401例乳腺腫塊超聲圖像特征，結(jié)合手術(shù)或穿刺活檢病理結(jié)果以第5版乳腺影像報告與數(shù)據(jù)系統(tǒng)病灶超聲特征并加入年齡因素，建立LOGISTIC回歸模型；依據(jù)回歸模型篩選結(jié)果及各因素的權(quán)重提出BIRADS3～5類評分分類標準。另納入243例乳腺腫塊作為測試組，對所有研究病例分別進行評分分類，以病理結(jié)果為金標準，計算每類的陽性預(yù)測值，與BIRADS各類別的理論風險范圍相比較，觀察兩者的一致性，評估該評分分類系統(tǒng)的診斷價值。結(jié)果1、多因素回歸分析顯示最后進入模型的因素共6個分別為年齡（≥40歲）、方位（不平行）、形態(tài)（不規(guī)則）、內(nèi)部回聲（不均勻）、邊緣（不光整）、腫塊內(nèi)微鈣化。2、依據(jù)回歸模型篩選結(jié)果及各因素對腫塊良、惡性貢獻率不同，制定評分分類系統(tǒng)，BIRADS3、4A、4B、4C、5類相對應(yīng)的分值為6分、7～8分、9～15分，16～22分，≥23分。3、模型病例綜合評分的BIRADS3～5類的陽性預(yù)測值分別為0、267、1618、9074、100；測試病例綜合評分的BIRADS3～5類的陽性預(yù)測值分別為0、417、2143、8485、100；所有研究病例綜合評分的BIRADS3～5類的陽性預(yù)測值為0、325、1770、8851、100。4、測試病例ROC曲線下分析，曲線下面積為0948。以14分作為乳腺腫塊良惡性的CUTOFF值（診斷界點），其靈敏度為9010、特異度9014、約登指數(shù)080、準確率9012。結(jié)論利用多因素建立的乳腺腫塊LOGISTIC回歸模型并以此制定的BIRADS評分分類系統(tǒng)，能夠?qū)θ橄倌[塊BIRADS系統(tǒng)進行客觀的分類，為臨床評價乳腺腫塊的良、惡性提供有效參考依據(jù)。

簡介：安徽醫(yī)科大學碩士學位論文分類號密級UDC編號學位論文超支化聚磷酸酯納米藥物引導(dǎo)的化療協(xié)同光熱療法用于逆轉(zhuǎn)乳腺癌細胞耐藥的研究HYPERBRANCHEDPOLYPHOSPHOESTERMICELLARNANOMEDICINEFORNIRIMAGINGGUIDEDTHERMOCHEMOTHERAPYTOREVERSEACQUIREDRESISTANCEOFBREASTCANCERCELLS姚夢群姚夢群指導(dǎo)教師姓名仲飛副教授安徽醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院申請學位級別碩士專業(yè)名稱腫瘤學提交論文日期201703論文答辯日期201705學位授予單位和日期安徽醫(yī)科大學答辯委員會主席夏黎明教授評閱人雙盲評閱2017年05月安徽醫(yī)科大學碩士學位論文

簡介：點擊查看更多ER、PgR、HER-2、Ki67及分子分型對乳腺癌新輔助化療療效預(yù)測的研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：?帥川LILILLILII㈣?Ⅲ?洲Y3345675分類號R730．51密級公開圜單位代碼10159學號201353049碩士學位論文中文題目同等學力人員申請碩士學位臍帶血來源的INKT細胞體外培養(yǎng)及其對乳腺癌細胞殺傷作用的研究；∈文題目PREPARATIONOFINKTCELLSDERIVED仔OMUMBILICALCORDBLOODANDANALYSISOFCYTOTOXICEF詫CTTOBREASTCANCERCELLSINVITRO論文作者指導(dǎo)教師I鼉孟凡東教授‰中國醫(yī)科大學學位論文獨創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明本論文是我個人在導(dǎo)師指導(dǎo)下獨立進行的研究工作及取得的研究成果，論文中除加以標注的內(nèi)容外，不包含其他人或機構(gòu)已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含本人為獲得其他學位而使用過的成果。對本研究提供貢獻的其他個人和集體均已在文中進行了明確的說明并表示謝意。本人完全意識到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔。論文作者簽名王也日期多D『7年F7月弓D日中國醫(yī)科大學學位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學位論文作者完全了解學校有關(guān)保留、使用學位論文的規(guī)定，同意學校保留并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交學位論文的原件、復(fù)印件和電子版，允許學位論文被查閱和借閱。本人授權(quán)中國醫(yī)科大學可以將本學位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編學位論文。保密，在年后解密適用本授權(quán)書。保密請在括號內(nèi)劃“√“論文作者簽名王趁日期ZDFL年，，月鄉(xiāng)汐日指導(dǎo)教師簽名缸氧日期加／7年／／月；口日

簡介：浙江大學碩士學位論文必需氨基酸濃度對奶牛乳腺酪蛋白Α基因表達的影響姓名來金良申請學位級別碩士專業(yè)動物營養(yǎng)與飼料科學指導(dǎo)教師吳躍明劉建新200605012006浙江大學碩士學位論文縮略詞

簡介：目的本實驗通過觀察干酪乳桿菌（LACTOBACILLUSCASEI）對二甲基苯蒽（DMBA）誘發(fā)乳腺癌大鼠的血清中細胞因子和外周血中自然殺傷NK細胞活性、T淋巴細胞亞群分布的影響來評價干酪乳桿菌對乳腺癌大鼠免疫功能的調(diào)節(jié)。通過觀察干酪乳桿菌對二甲基苯蒽誘發(fā)乳腺癌大鼠的腸道菌群和腸道連接蛋白表達的影響來評價干酪乳桿菌對乳腺癌大鼠腸道屏障功能的調(diào)節(jié)。為進一步闡述干酪乳桿菌對二甲基苯蒽誘發(fā)的大鼠乳腺腫瘤的抑制作用機制提供實驗依據(jù)。方法1干酪乳桿菌對二甲基苯蒽誘發(fā)乳腺腫瘤的抑制作用及其免疫功能的影響。（1）動物分組及乳腺癌模型建立60只雌性SD大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后，按體質(zhì)量隨機分為正常對照組、模型組、干酪乳桿菌劑量1組和干酪乳桿菌劑量2組。模型組及干酪乳桿菌劑量1組和2組大鼠右側(cè)臀部皮下一次性注射100MGKGDMBA建立乳腺癌模型。干酪乳桿菌劑量1組和2組分別灌胃給予4MLKGD和8MLKGD干酪乳桿菌（1108CFUML），正常對照組和模型組均給予5MLKGD大豆油灌胃。每天1次，持續(xù)16周后處死大鼠，腹主動脈取血并留取胸腺，脾臟，小腸組織。（2）計算各組大鼠乳腺癌發(fā)生率、潛伏期、平均瘤重、抑瘤率及臟器指數(shù)。（3）流式細胞術(shù)檢測大鼠外周血中NK細胞活性和T淋巴細胞亞群分布。（4）酶聯(lián)免疫吸附實驗ELISA檢測血清中細胞因子白介素4（IL4）、IL6、IL10、IL12、干擾素Γ（IFNΓ）和腫瘤壞死因子?。═NFΑ）的水平。2干酪乳桿菌對二甲基苯蒽誘導(dǎo)乳腺癌大鼠腸道菌群和腸道屏障功能的影響。（1）實時熒光定量PCR（QPCR）檢測大鼠腸道菌群的變化。（2）HE染色觀察大鼠空腸組織病理學改變。（3）ELISA檢測大鼠血清中D乳酸（DLA）水平。（4）WESTERNBLOTTING檢測大鼠空腸組織緊密連接蛋白OCCLUDIN和ZO1的表達水平。結(jié)果1干酪乳桿菌對二甲基苯蒽誘發(fā)乳腺腫瘤的抑制作用及其免疫功能的影響。（1）正常對照組大鼠無腫瘤發(fā)生，而模型組、干酪乳桿菌劑量1組和2組均有腫瘤發(fā)生。與模型組比較，干酪乳桿菌劑量2組大鼠腫瘤潛伏期延長，腫瘤發(fā)生率和平均瘤質(zhì)量降低（P＜005）；抑瘤率達到412；且該組胸腺指數(shù)顯著升高（P＜005）；（2）流式細胞術(shù)結(jié)果顯示，與模型組比較，干酪乳桿菌劑量2組大鼠TCRΑΒCD161ANK細胞百分比、CD3CD8T細胞百分比均顯著升高（P＜005）；而血中CD3FOXP3細胞百分比明顯下降（P＜005）。（3）與正常對照組比較，模型組IL4水平明顯降低，而IL6、IL12和TNFΑ水平顯著升高（P＜005）；與模型組比較，干酪乳桿菌劑量2組血清IL4、IL10濃度顯著增高，IL6、IL12濃度顯著下降（P＜005）；干酪乳桿菌劑量1組和2組TNFΑ濃度均顯著下降（P＜005）。2干酪乳桿菌對二甲基苯蒽誘導(dǎo)乳腺癌大鼠腸道菌群和腸道屏障功能的影響。（1）QPCR結(jié)果顯示，與正常對照組比較，模型組雙歧桿菌、乳酸桿菌和糞腸球菌數(shù)量均下降，其中雙歧桿菌和糞腸球菌數(shù)量下降有統(tǒng)計學意義（P＜005）；干酪乳桿菌劑量1組和2組雙歧桿菌數(shù)量均比模型組顯著升高（P＜005），而大腸桿菌的數(shù)量有所降低。（2）HE染色結(jié)果顯示，與模型組比較，干酪乳桿菌劑量1組和2組大鼠空腸內(nèi)絨毛和隱窩的形態(tài)明顯完整，結(jié)構(gòu)清晰，絨毛的損傷程度較小。但與正常組比較，干酪乳桿菌劑量1組和2組小腸黏膜厚度減少，絨毛的排列也較為凌亂，絨毛尖端有水腫的現(xiàn)象。（3）ELISA結(jié)果顯示，與正常對照組比較，模型組DLA濃度顯著升高，而與模型組比較，干酪乳桿菌劑量2組DLA濃度顯著下降（P＜005）。（4）WESTERNBLOTTING結(jié)果顯示，與正常對照組比較，模型組緊密連接蛋白OCCLUDIN和ZO1的表達均顯著下降，而干酪乳桿菌劑量2組均比模型組顯著升高（P＜005）。結(jié)論1干酪乳桿菌對大鼠乳腺腫瘤的生長具有一定的抑制作用。2干酪乳桿菌可調(diào)節(jié)CD4、CD8T細胞、NK細胞及調(diào)節(jié)性T細胞等免疫細胞分布，改善炎性相關(guān)細胞因子水平，提高機體免疫調(diào)節(jié)作用。3干酪乳桿菌可改善腸道菌群的分布，降低血清中DLA濃度、增加腸道緊密連接蛋白OCCLUDIN、ZO1的表達，提高機體的腸道屏障功能。

簡介：目的探討2013版BIRADS分類、單獨使用不同超聲彈性評估方法（2013版BIRADS超聲彈性分級法、彈性應(yīng)變率比值法、面積比值法）以及兩者聯(lián)合的方法在乳腺腫塊良惡性鑒別中的診斷價值。方法選取98例患者，共計103個腫塊，所有腫塊均用常規(guī)超聲和彈性成像兩種方式進行檢查，按照2013版BIRADS分類標準進行分類，所有病灶行穿刺活檢術(shù)或手術(shù)切除術(shù)，獲取標本送病理診斷，對照病理結(jié)果構(gòu)建ROC曲線確定兩種彈性評估方法（SR法和AR法）的最佳診斷截斷點，用三種不同的彈性評估方法對腫塊的性質(zhì)進行評判，再根據(jù)不同的彈性評估結(jié)果對BIRADS分類進行調(diào)整，比較不同方法之間的差異。結(jié)果1BIRADS分類在進行乳腺腫塊良惡性診斷時的靈敏度是9385％，特異度是9474，準確度是9417。2彈性分級法、應(yīng)變率比值法、面積比值法診斷乳腺腫塊良惡性的準確度分別為7087，8252，8252；靈敏度分別為9024，9091，9091；特異度分別為5806，7292，7292。3BIRADS分類聯(lián)合三種不同彈性評估方法分級法、SR法、AR法診斷乳腺腫塊良惡性的準確度分別為9126，9029，8932；靈敏度分別為9355，9344，9194；特異度分別為878，8571，8537。4構(gòu)建ROC曲線，BIRADS分類、不同彈性評估方法（分級法、SR法、AR法）、BIRADS分類聯(lián)合三種不同彈性評估方法分級法、SR法、AR法ROC曲線下的面積分別為0952077808430892095109650952。結(jié)論12013版BIRADS分類、單獨使用不同的彈性成像評估方法、兩種方法聯(lián)合在乳腺病灶良惡性鑒別中均具有診斷價值。2單獨使用不同的彈性成像評估方法進行診斷時，超聲彈性分級法有一定的局限性，應(yīng)變率比值法、面積比值法作為一種半定量評價方法在一定程度可以避免醫(yī)師的主觀影響比其具有更高的診斷價值。3二維超聲是診斷的基礎(chǔ)，彈性成像技術(shù)可以作為常規(guī)超聲的補充，為BIRADS分類提供更多的參考信息，提升超聲醫(yī)生的診斷信心，為臨床診療提供更好的服務(wù)。

簡介：乳腺X線攝影檢查是目前公認的早期診斷乳腺癌的有效手段，高品質(zhì)的圖像質(zhì)量是提高乳腺X線攝影的乳腺癌檢出率的前提和保證。采用不同能量的X射線、不同陽極濾過組合進行曝光，患者所受到的輻射劑量有明顯不同，所得的圖像質(zhì)量也有所差別。因此，選擇合理的X射線能量、陽極濾過的組合，可在保證圖像質(zhì)量的前提下，降低患者所受的輻射劑量。本研究探討了目前市場上最流行的兩種不同結(jié)構(gòu)類型的平板探測器的全視野數(shù)字乳腺X線攝影系統(tǒng)，一種是單層非晶硒加薄膜晶體管的平板探測器，另一種是雙層非晶硒加直接光開關(guān)技術(shù)的平板探測器，采用不同陽極濾過組合、不同管電壓、管電流等拍攝條件對RMI156和CDMAM模體進行曝光，檢測所得圖像的纖維條數(shù)、鈣化點、腫塊數(shù)、圖像質(zhì)量因子與輻射劑量，評價圖像質(zhì)量、輻射劑量與拍攝條件之間的關(guān)系，研究發(fā)現(xiàn)過分提高管電壓或管電流的值，不能提高顯示鈣化點的能力，卻會增加患者所受平均腺體劑量AVERAGEGLULARDOSEAGD的值。因此，在拍攝的感興趣對象為鈣化點時，可以適當降低電壓、電流值，并不會明顯降低鈣化點的顯示，卻可以降低患者所受的輻射劑量；纖維和腫塊的評分不與電壓電流成正比，并存在較優(yōu)值；不同陽極濾過組合對纖維、腫塊、鈣化點的評分值分布不同，在相同管電壓、管電流條件下，單層非晶硒平板探測器的成像質(zhì)量高于雙層非晶硒；鎢靶銀濾過組合（記為WAG）的圖像質(zhì)量因子在五組陽極濾過組合中較好；單層非晶硒的鎢靶銠濾過組合（記為WRH）與雙層非晶硒的WRH在整個過程中輻射劑量相同，但圖像質(zhì)量單層非晶硒的WRH較好。

簡介：近年來乳腺癌的發(fā)病率越來越高，基于圖像導(dǎo)航微創(chuàng)介入式手術(shù)越來越廣泛應(yīng)用于乳腺癌的診斷和治療。而核磁共振成像技術(shù)對軟組織的成像特別清晰，具有較精確的導(dǎo)航性能。但核磁共振儀內(nèi)較強的磁場環(huán)境和有限的工作環(huán)境對乳腺介入機器人的應(yīng)用提出了較高的要求。因此對MRI環(huán)境下乳腺介入機器人的研究具有非常重要的意義。本文設(shè)計了一款核磁兼容的乳腺介入機器人，并對其運動學和工作空間進行了分析，另外還對位姿調(diào)整模塊運動特性和控制性能進行了分析。針對MRI環(huán)境下的乳腺活檢穿刺手術(shù)為例，設(shè)計了一款核磁兼容的乳腺介入機器人。首先對核磁環(huán)境下機器人材料、結(jié)構(gòu)和驅(qū)動系統(tǒng)的兼容性要求進行分析，明確機器人的限制因素；其次通過對乳腺活檢手術(shù)的工作過程分析，確定了機器人各模塊的自由度，并完成機器人的構(gòu)型設(shè)計；最后分別對機器人的定位裝置、位姿調(diào)整模塊和穿刺模塊進行具體設(shè)計，應(yīng)用CREO20構(gòu)建機器人的虛擬樣機。對乳腺介入機器人進行運動學分析，建立相應(yīng)的運動學方程；通過理論分析可知，連桿的長度誤差、機器人基平臺的半徑誤差和機器人動平臺上的夾角誤差是造成機器人位姿誤差的主要因素，利用仿真分析給出不同條件下三者對乳腺介入機器人位姿誤差的影響；利用SIMMECHANICS軟件對乳腺介入機器人的工作空間進行仿真。建立SIMMECHANICS的運動學仿真程序和機器人仿真機構(gòu)簡圖，通過仿真驗證了機器人的工作區(qū)間滿足要求。位姿調(diào)整模塊的運動是利用雙螺桿的驅(qū)動原理來實現(xiàn)的，每個關(guān)節(jié)的三個螺桿均勻的分布在圓周上。所以整個圓周被分為了三個區(qū)域，根據(jù)方位角的取值不同，分別推導(dǎo)出關(guān)節(jié)中的每個螺桿的轉(zhuǎn)數(shù)與機器人的位姿調(diào)整模塊的參數(shù)彎曲角、方位角以及機器人位姿調(diào)整模塊的高度變化量S之間的具體函數(shù)關(guān)系表達式。對雙螺桿驅(qū)動的并聯(lián)關(guān)節(jié)進行動力學分析建立其動力學模型，并對雙向控制的穩(wěn)定性進行分析，然后對該模型進行了仿真分析，通過仿真分析驗證了該方法對雙螺桿機構(gòu)有較好的控制效果。對活檢針進行受力分析，根據(jù)組織刺破前后受力的特點，分別對剛性力、摩擦力和切割力進行建模，并且推導(dǎo)出基于優(yōu)化的KARNOPP摩擦模型的活檢針穿刺力數(shù)學模型和基于DAHL摩擦模型的活檢針穿刺力模型；最后通過實驗對兩種模型進行了驗證分析，表明基于DAHL摩擦模型的活檢針穿刺力模型擬合效果較好。

簡介：分類號R730密級公開UDC610編號2017141051010322014級攻讀碩士學位研究生畢業(yè)論文超聲光散射成像對乳腺腫塊良惡性鑒別診斷的應(yīng)用研究超聲光散射成像對乳腺腫塊良惡性鑒別診斷的應(yīng)用研究CLINICALAPPLICATIONRESEARCHOFULTRASOUNDWITHDIFFUSEOPTICALIMAGINGSYSTEMINDIFFERENTIATINGMALIGNANTBENIGNBREASTLESION二〇一七年五月指導(dǎo)教師李國元教授學生姓名王樹燕學科專業(yè)名稱內(nèi)科學（腫瘤?。┭芯糠较蚺R床醫(yī)療技能訓練與研究學院系、部青海大學研究生院I獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學位論文是我個人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除文中已經(jīng)標明引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果。對本文的研究做出貢獻的個人和集體，均已在文中以明確方式標明。本人完全意識到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔。學位論文作者簽名日期2017年5月31日學位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學位論文作者完全了解學校有關(guān)保留、使用學位論文的規(guī)定，即學校有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)青海大學可以將本學位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學位論文。本論文屬于保密□不保密√（請在相應(yīng)方框內(nèi)打“√”），在_____年解密后適用本授權(quán)書。學位論文作者簽名指導(dǎo)教師簽名日期2017年5月31日日期2017年5月31日

簡介：目的他莫昔芬對ERΑ陽性的乳腺癌患者有良好的治療效果，但是耐藥性的出現(xiàn)限制其效果和應(yīng)用。目前認為細胞自噬可能為導(dǎo)致他莫昔芬耐藥性的關(guān)鍵機制之一，但此種保護性自噬形成的具體分子機制及如何促使他莫昔芬產(chǎn)生耐藥性尚未闡明。藁本內(nèi)酯為當歸、川芎中的主要活性成分之一，在目前的研究中，僅有一篇文獻指出藁本內(nèi)酯能調(diào)控TNFΑ誘導(dǎo)的細胞自噬，它對自噬的具體作用并未做探究，且藁本內(nèi)酯能否恢復(fù)耐藥ERΑ陽性乳腺癌細胞的他莫昔芬敏感性也還未見報道。本研究擬首先闡明他莫昔芬耐藥性產(chǎn)生過程中保護性自噬形成的機制，并且明確保護性自噬對DNA損傷修護機制的影響，進而揭示他莫昔芬耐藥性產(chǎn)生的機制。同時，以藁本內(nèi)酯為研究對象，對其抑制自噬及DNA損傷修護機制和恢復(fù)耐他莫昔芬的ERΑ陽性乳腺癌細胞的敏感性進行了初步探索。方法采用高濃度短時間他莫昔芬沖擊法誘導(dǎo)乳腺癌細胞的耐藥性。在表征敏感株與耐藥株之間的區(qū)別方面以磺酰羅丹明B法檢測他莫昔芬對敏感株和耐藥株細胞存活率的影響。再以GFPLC3觀察敏感株和耐藥株中基礎(chǔ)自噬水平的差別；采用WESTERNBLOTTING檢測相關(guān)蛋白的表達輔以驗證。隨后加入自噬抑制劑氯喹探討耐藥株中的自噬是否對其存活有保護作用。最后用免疫共沉淀的方法探討耐藥株中自噬水平升高的分子機制。在考察藁本內(nèi)酯對細胞自噬的調(diào)控作用及其分子機制方面首先RFPLC3和WESTERNBLOTTING檢測藁本內(nèi)酯對細胞自噬的調(diào)控作用；加入氯喹聯(lián)合處理輔以驗證。后以TFMRFPGFPLC3質(zhì)粒、GFPLC3RFPLAMP1質(zhì)粒瞬時轉(zhuǎn)染、檢測組織蛋白酶D的表達和溶酶體的PH等實驗確定藁本內(nèi)酯調(diào)控自噬的機制。在考察藁本內(nèi)酯恢復(fù)耐藥乳腺癌細胞的他莫昔芬敏感性方面首先以磺酰羅丹明B法檢測藁本內(nèi)酯單獨或聯(lián)合他莫昔芬對耐藥乳腺癌細胞存活率的影響，同時以克隆形成實驗和HOECHST33342染色輔以驗證。再檢測PARP的表達以及泛CASPASE抑制劑（ZVADFMK）對細胞存活率的恢復(fù)作用，考察藁本內(nèi)酯恢復(fù)他莫昔芬細胞毒性是否通過CASPASE途徑。在考察DNA損傷及藁本內(nèi)酯是否干擾DNA損傷修復(fù)機制方面首先考察DNA損傷相關(guān)蛋白的表達情況，進一步地采用SHRNA抑制NUR77的表達后，考察是否NUR77對耐藥株DNA損傷水平和細胞存活率有影響。接下來加入泛素化抑制劑MG132、SIRNA抑制BECLIN1、藁本內(nèi)酯、氯喹處理細胞，通過WESTERNBLOTTING檢測NUR77能否被恢復(fù)表達。最后通過免疫共沉淀和DNA親和沉淀實驗（DAPA）法探討藁本內(nèi)酯如何通過NUR77干擾DNA損傷修復(fù)途徑的機制。結(jié)果對比MCF7和T47D細胞，MCF7TR5和T47DTR5細胞對5ΜM的他莫昔芬表現(xiàn)出良好的耐受性。GFPLC3質(zhì)粒瞬時轉(zhuǎn)染后，比之MCF7細胞，MCF7TR5細胞中觀察到綠色點狀熒光聚集，自噬標記物LC3III、P62蛋白的表達下降，且BRCA1、NUR77等蛋白表達也降低；而通過氯喹抑制自噬后能明顯增強他莫昔芬的細胞毒性；最后，免疫共沉淀實驗結(jié)果表明BECLIN1PI3KC3ATG14復(fù)合物結(jié)合增加。MRFPLC3質(zhì)粒瞬時轉(zhuǎn)染MCF7TR5細胞后，藁本內(nèi)酯能明顯增加細胞內(nèi)紅色點狀熒光聚集；進一步的WESTERNBLOTTING結(jié)果表明藁本內(nèi)酯以時間和劑量依賴性方式增加LC3III和P62的表達，與氯喹類似。隨后TFMRFPGPFLC3轉(zhuǎn)染MCF7TR5細胞后，藁本內(nèi)酯和氯喹誘導(dǎo)MCF7TR5細胞中黃色熒光增加；GFPLC3和RFPLAMP1共同轉(zhuǎn)染MCF7TR5細胞，藁本內(nèi)酯導(dǎo)致細胞內(nèi)黃色熒光減少，二者均表明自噬溶酶體融合受阻。進一步地實驗結(jié)果表明藁本內(nèi)酯能下調(diào)組織蛋白酶D的表達，并中和溶酶體PH。藁本內(nèi)酯聯(lián)合他莫昔芬處理耐藥乳腺癌細胞后，實驗表明聯(lián)合給藥能夠增加耐藥乳腺癌細胞的凋亡，降低耐藥乳腺癌細胞存活率及細胞集落的形成。然而活化的PARP表達沒有變化；與之相符合的是泛CASPASE抑制劑ZVADFMK也不能恢復(fù)聯(lián)合給藥下調(diào)的細胞存活率。對比MCF7細胞，MCF7TR5細胞中BRCA1、RAD51表達下降，表明DNA損傷修復(fù)的同源重組修復(fù)途徑受損，而KU80表達上升，則DNA損傷修復(fù)的非同源性末端接合機制啟動。實驗結(jié)果表明MCF7TR5細胞中ΓH2AX的表達高于MCF7細胞；隨后對比單獨的他莫昔芬，藁本內(nèi)酯聯(lián)合他莫昔芬能上調(diào)細胞內(nèi)ΓH2AX的表達。SHRNA法抑制細胞內(nèi)NUR77的表達后，聯(lián)合給藥導(dǎo)致的ΓH2AX表達積累和下調(diào)MCF7TR5細胞存活率的作用被逆轉(zhuǎn)。隨后，MG132、SIRNA抑制BECLIN1、氯喹和藁本內(nèi)酯分別處理細胞后，結(jié)果表明只有抑制自噬能夠恢復(fù)NUR77的表達。接下來，免疫共沉淀法證實在MCF7TR5細胞中，NUR77與KU80的相互作用減弱，但藁本內(nèi)酯能夠增強二者的相互作用；最后DNA親和沉淀實驗證實藁本內(nèi)酯能夠抑制KU80和DNAPKCS分別與DNA末端的結(jié)合作用。結(jié)論隨著他莫昔芬的治療，乳腺癌細胞內(nèi)BECLIN1與BCL2的結(jié)合減弱，釋放出BECLIN1，導(dǎo)致BECLIN1PI3KC3ATG14復(fù)合物結(jié)合增加，自噬水平上升，產(chǎn)生耐藥性促進癌細胞存活。此外，由于BRCA1和RAD51表達的下降，KU80表達的升高，MCF7TR5細胞出現(xiàn)更高的DNA損傷水平。有趣的是，耐藥株中過高的細胞自噬導(dǎo)致NUR77的表達降低，使其與KU80形成的復(fù)合物降低，導(dǎo)致非同源重組修復(fù)水平升高。在細胞自噬方面，藁本內(nèi)酯通過干擾自噬體與溶酶體的融合和影響溶酶體功能抑制自噬。更重要的是，藁本內(nèi)酯抑制自噬恢復(fù)MCF7TR5細胞中NUR77的表達，從而促進NUR77與KU80的相互作用，導(dǎo)致DNAPKCS和KU80分別與DNA末端的結(jié)合作用受到抑制，干擾DNA損傷修復(fù)，最終增強他莫昔芬的細胞毒性。本研究不僅對乳腺癌細胞中他莫昔芬耐藥性的形成進行了深入探討，且證實藁本內(nèi)酯是一種有效的自噬抑制劑，并且在抗腫瘤的聯(lián)合治療方面可能具有潛在作用。

簡介：乳腺癌是全球女性最常見的惡性腫瘤之一，目前尚無有效的預(yù)防措施。隨著乳腺癌的發(fā)病率逐年上升，乳腺癌的早發(fā)現(xiàn)、早診斷是降低乳腺癌患者死亡率的有效手段。由于近紅外光譜掃描操作方便，成本較低，是乳腺疾病檢測的重要方法之一，廣泛應(yīng)用于乳腺疾病的普查中。但是得到的近紅外乳腺圖像中，通過肉眼診斷乳腺癌變的成功率并不十分理想，而且需要醫(yī)生有很高的專業(yè)能力。因此，對近紅外乳腺圖像進行處理，以輔助醫(yī)生診斷，并在此基礎(chǔ)上，實現(xiàn)癌變部位的自動分類，具有重大意義。本文的主要研究工作與成果如下1針對近紅外乳腺圖像提出了基于CANNY算子的加權(quán)引導(dǎo)濾波，對圖像進行預(yù)處理，并與基于方差的加權(quán)引導(dǎo)濾波進行了對比。采用不同的窗口半徑及規(guī)整化因子對圖像進行處理，減小噪聲的同時又加強了邊緣紋理信息，得到了良好的預(yù)處理效果，驗證了本文預(yù)處理算法的優(yōu)越性。2在預(yù)處理的基礎(chǔ)上采用模糊C均值聚類算法對圖像進行分割，詳細的分析了網(wǎng)絡(luò)初始化的參數(shù)的設(shè)定，不需要任何人工干預(yù)即可進行自動分割，可以將癌變部位和正常的乳房組織分割開來，得到了良好的分割結(jié)果，可以有效輔助醫(yī)生定位癌變部位。3提出了11層的VGGVISUALGEOMETRYGROUP卷積神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)。采用該網(wǎng)絡(luò)對近紅外乳腺訓練圖像進行訓練學習，利用不同尺度的測試圖像塊進行測試，并進行對比，確定了測試效果最優(yōu)的圖像塊尺度，得到了良好的分類結(jié)果，分類的準確率較高。通過與FCM聚類分析算法的結(jié)果進行比較，VGG卷積神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)不需要預(yù)先設(shè)定各種參數(shù)，通過不斷的迭代可以尋求最優(yōu)參數(shù)，使得網(wǎng)絡(luò)更加具有魯棒性和優(yōu)越性。實驗結(jié)果表明，對近紅外乳腺圖像采用VGG卷積神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)進行分類，可以得到較好的分類結(jié)果，準確率達到了81％。