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文檔簡(jiǎn)介
1、目的對(duì)山藥粗多糖的提取工藝進(jìn)行初步研究,將其制備成納米山藥粗多糖,并考察制劑質(zhì)量。通過(guò)建立體內(nèi)體外模型,研究納米山藥多糖降血糖、降血脂的作用及機(jī)理,為開(kāi)發(fā)糖尿病及高脂血癥的天然藥物提供了依據(jù)。
方法采用熱水提取和閃式提取工藝分別提取山藥粗多糖,水提醇沉法分離山藥粗多糖,苯酚-硫酸法測(cè)定粗多糖的含量,并進(jìn)行方法學(xué)考察。采用高能球磨法制備納米山藥多糖,用激光粒度分布儀測(cè)定納米山藥多糖的粒度分布,SEM觀察其表面形態(tài)。通過(guò)腹腔注射四
2、氧嘧啶誘導(dǎo)糖尿病大鼠模型,連續(xù)灌胃給藥12d后,測(cè)定大鼠空腹血糖、糖耐量、C肽、肝糖原的水平,并記錄大鼠給藥前后體重、飲水量、飲食量的變化,從而研究納米山藥多糖對(duì)四氧嘧啶糖尿病大鼠血糖代謝的影響。通過(guò)喂養(yǎng)大鼠4w高脂飼料建立高脂大鼠模型,連續(xù)灌胃給藥30d后,測(cè)定大鼠血清TC、TG、HDL-C及LDL-C的含量,進(jìn)而考察納米山藥多糖對(duì)高脂血癥大鼠血脂代謝的影響。采用10-7mol/L濃度的胰島素持續(xù)作用HepG2細(xì)胞24h,建立胰島素抵
3、抗模型,通過(guò)葡萄糖氧化酶法測(cè)定培養(yǎng)液中葡萄糖含量,用MTT法測(cè)定山藥多糖對(duì)細(xì)胞增殖的影響,考察山藥多糖對(duì)HepG2細(xì)胞葡萄糖吸收能力及胰島素抵抗的影響。
結(jié)果熱水提取和閃式提取工藝提取山藥粗多糖得率分別為0.78%、0.53%,含量分別為33.63%、27.38%。方法學(xué)研究表明精密度和重復(fù)性良好,且山藥粗多糖樣品在2h內(nèi)穩(wěn)定。采用高能球磨法制備出的納米山藥多糖表面圓整,無(wú)粘連,平均粒徑為520nm,且穩(wěn)定性良好。大鼠腹腔注射
4、200mg/kg的四氧嘧啶可以成功誘導(dǎo)糖尿病大鼠模型,連續(xù)30d喂食大鼠高脂飼料可以成功誘導(dǎo)高脂血癥大鼠模型,分別給予模型大鼠50mg/mL和100mg/mL劑量的納米山藥多糖12d和30d后,山藥多糖各劑量組可以顯著降低四氧嘧啶糖尿病大鼠的血糖值(P<0.05),血糖值分別降低了22.86%、8.85%,改善其糖耐量,提高肝糖原及C肽含量(P<0.05),改善糖尿病大鼠的三多一少癥狀,并且可以顯著降低高脂大鼠血清TG、TC、LDL-C
5、的含量(P<0.05)。山藥多糖各劑量組具有明顯的抑制a-葡萄糖苷酶活性的作用,其抑制率分別為31.15%、2.49%。10-7mol/L濃度的胰島素可以成功誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞胰島素抵抗模型。與對(duì)照組相比,山藥多糖各劑量組均不同程度的增加了正常HepG2細(xì)胞及胰島素抵抗HepG2細(xì)胞葡萄糖消耗量(P<0.01)。
結(jié)論高能球磨法制備的納米山藥多糖安全可靠,在體內(nèi)吸收加快而具有特殊生物學(xué)效應(yīng)。納米山藥多糖具有明顯調(diào)節(jié)糖代謝,改善
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