心肌細胞特異性敲除Cdc42對心肌缺血再灌注損傷的保護作用及其相關機制研究.pdf

1、背景和目的：心臟缺血再灌注損傷和心肌肥大是兩種常見的心臟疾病，兩者都可導致心臟功能障礙和心力衰竭。目前對其細胞內相關信號通路的研究仍然不十分清楚。Rho家族的小分子G蛋白Cdc42，主要是作為一個細胞內的分子開關，參與細胞極化、基因轉錄、遷移、細胞骨架形成和癌細胞侵襲等細胞活動。本研究的目的旨在觀察Cdc42缺失對心臟缺血再灌注損傷的影響，并對其可能的分子機制進行探討。
　　材料與方法：利用Cdc42flox/flox小鼠和MLC

2、-2C-Cre小鼠進行雜交得到生長發(fā)育良好且可以穩(wěn)定繁殖的心臟特異性敲除Cdc42flox/flox[Cre]小鼠。利用Langendorff系統灌流離體心臟造成缺血再灌注損傷，通過觀察流量的變化情況和心肌細胞釋放 LDH的量分析心臟損傷的嚴重程度。利用異丙腎上腺素（Isoprenaline，簡稱ISO）和血管緊張素Ⅱ（Angiotensin II，簡稱AngⅡ）兩種不同的藥物處理體外成年心肌細胞，并檢測相關基因的表達變化以及分析Cdc

3、42調控的信號傳導途徑。
　　結果：我們觀察到，在控制灌注壓穩(wěn)定的條件下心肌特異性敲除Cdc42小鼠心臟在缺血再灌注損傷時，與正常小鼠組比較，其冠脈灌流量增加，而心肌細胞釋放的LDH含量明顯減少。在藥物處理體外成年心肌細胞時，發(fā)現Cdc42缺失可明顯降低異丙腎上腺素引起的糖原合成酶激酶-3β（GSK-3β）和鈣調磷酸酶催化亞基A（PPP3CA）表達，進而調節(jié)心肌細胞轉錄因子GATA4和Mef2的表達。
　　結論：我們成功構建