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文檔簡介
1、目的:了解甲氨蝶呤對C反應蛋白在體外培養(yǎng)類風濕關節(jié)炎成纖維細胞樣滑膜細胞中的致炎作用的影響。
方法:體外培養(yǎng)類風濕關節(jié)炎成纖維細胞樣滑膜細胞和正常人成纖維細胞樣滑膜細胞。分別設立空白對照組、CRP刺激組、MTX加CRP作用組,用實時熒光定量聚合酶連反應和酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測各組IL-6、MMP3、TNFα的mRNA和蛋白表達。免疫印跡法檢測各組磷酸化P65、IκB的表達。
結果:CRP能明顯上調RAFLS表達的IL-
2、6、MMP3、TNFα的mRNA和蛋白表達水平,且比HFLS明顯升高,提示CRP有促炎作用。CRP能使RAFLS的磷酸化P65水平明顯增加,IκB明顯減少,提示 CRP能活化 NF-κB信號通路。MTX能下調 RAFLS的CRP的mRNA和蛋白表達。MTX能拮抗CRP上調RAFLS表達IL-6、MMP3、TNFα的mRNA和蛋白表達水平的作用,能拮抗CRP增加RAFLS的磷酸化P65水平和降解IκB的作用。
結論:MTX可以通
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