兔抗GCET2單克隆抗體的制備及其在DLBCL診斷中的應(yīng)用.pdf

1、目的：開(kāi)發(fā)制備GCET2兔單克隆抗體，研究其在彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤（diffuse largeB cell lymphoma，DLBCL）診斷中的應(yīng)用。
　　方法：用人GCET2蛋白片段免疫兔子，取血清效價(jià)最高兔子的脾細(xì)胞與兔骨髓瘤細(xì)胞240E-W3融合，采用兔單克隆抗體技術(shù)制備GCET2兔單克隆抗體;經(jīng)免疫印跡(WB)、免疫組化(IHC)和免疫細(xì)胞化學(xué)(ICC)，流式細(xì)胞術(shù)等方法鑒定其特異性;采用IHC法，檢測(cè)GCET2與其他DL

2、BCL診斷相關(guān)標(biāo)記(CD10、Bcl6、MUM1、GCET1、FOXP1、Ki67和c-myc)在81例DLBCL、5例濾泡細(xì)胞淋巴瘤（follicular lymphoma，F(xiàn)L）和2例Burkitt's淋巴瘤臨床樣本組織中的表達(dá)，并將GCET2增補(bǔ)進(jìn)Hans分類(lèi)法和Choi分類(lèi)法，比較在生發(fā)中心來(lái)源的DLBCL(Germinal center B-cell like DLBCL，GCB-DLBCL)診斷中的差異。
　　結(jié)果：經(jīng)

3、ELISA、WB、IHC、ICC及流式細(xì)胞術(shù)鑒定，GCET2(EP316)抗體能特異性識(shí)別生發(fā)中心B細(xì)胞及其來(lái)源的腫瘤組織和細(xì)胞系(Raji，Daudi和Ramos)中的GCET2蛋白;以Hans分類(lèi)法和Choi分類(lèi)法對(duì)81例DLBCL進(jìn)行分類(lèi)，GCB-DLBCL所占比例分別為21％(17/81)和23％(19/81)，增補(bǔ)GCET2后GCB-DLBCL診斷比例分別提高至54％(44/81)和52％(42/81)。此外，c-myc高表達(dá)