Ptch-1和Smo在不同級別膠質瘤中的表達及相關性研究.pdf

1、目的：研究SHH信號通路中Ptch-1蛋白和Smo蛋白在不同級別膠質瘤及正常腦組織中的表達情況及其相關性。
　　方法：
　　1.收集我院神經外科2014年至2016年手術獲得膠質瘤患者標本（依據《中國中樞神經系統(tǒng)膠質瘤診斷和治療指南》中WHO中樞神經系統(tǒng)腫瘤分類將膠質瘤分為 WHOⅠ-Ⅳ級，Ⅰ、Ⅱ級為低級別膠質瘤，Ⅲ、Ⅳ級為高級別膠質瘤。故將實驗分為高級別膠質瘤組和低級別膠質瘤組）。
　　2.將不同級別的膠質瘤組織共6

2、5例（其中高級別膠質瘤組41例，低級別膠質瘤組24例）及正常腦組織共10例，經甲醛固定待用。不同級別的膠質瘤組織共20例（其中高級別膠質瘤10例，低級別膠質瘤10例）及正常腦組織共10例，凍存于-80℃冰箱待用。（正常腦組織標本均來自神經外科顱腦外傷患者需行減壓的正常腦組織，術前已告知患者家屬標本的用途并取得患者家屬同意）
　　3.應用免疫組織化學檢測Ptch-1蛋白及Smo蛋白在不同級別的膠質瘤組和正常腦組織組中的表達水平。

3、r>　　4.應用qRT-PCR技術檢測Ptch-1蛋白及Smo蛋白的mRNA在不同級別的膠質瘤組和正常腦組織組中的表達水平。
　　5.應用蛋白質免疫印跡實驗（Western Blot）檢測Ptch-1蛋白及Smo蛋白在不同級別的膠質瘤組和正常腦組織組中的表達水平。
　　6.應用統(tǒng)計軟件IBM SPSS21.0對實驗數據進行統(tǒng)計分析。
　　結果：
　　1.免疫組化實驗結果：Ptch-1蛋白的表達水平：低級別膠質瘤組

4、陽性表達率為62.5％（15/24），高級別膠質瘤組陽性表達率為92.7%（38/41），兩者之間的陽性表達率差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。正常腦組織組中Ptch-1蛋白的陽性表達率為10%（1/10）。低級別膠質瘤組和高級別膠質瘤組陽性表達率與正常腦組織組的陽性表達率差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。Smo蛋白的表達水平：低級別膠質瘤組陽性表達率為75.0%（18/24），高級別膠質瘤組陽性表達率為95.1%（39/41），兩者

5、之間的陽性表達率差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。正常腦組織中 Smo蛋白的陽性表達率為：20%（2/10）。正常腦組織組的陽性表達率分別與低級別膠質瘤組、高級別膠質瘤組之間差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。
　　2.qRT-PCR實驗結果：各組中均可見目的蛋白mRNA的表達。其中低級別膠質瘤組Ptch-1 mRNA相對表達量是0.0018364±0.0015966，高級別膠質瘤組Ptch-1 mRNA相對表達量是0.002765

6、9±0.0028038，兩者之間差異無統(tǒng)計學意義（P=0.374＞0.05）。正常腦組織組Ptch-1 mRNA相對表達量是0.0006005±0.0005233。正常腦組織組分別和低級別膠質瘤組、高級別膠質瘤組之間的相對表達量差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。Smo mRNA在高級別膠質瘤組的相對表達量是0.0078187±0.0054682，其在低級別膠質瘤組的相對表達量是0.0037597±0.0016477，兩者之間相對表達量差

7、異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。Smo mRNA正常腦組織組相對表達量是0.0007974±0.0005546，正常腦組織組和低級別膠質瘤組、高級別膠質瘤組之間相對表達量差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。
　　3.Western Blot實驗結果：Ptch-1的相對表達量在低級別膠質瘤組中是0.4771±0.1187，在高級別膠質瘤中為0.6967±0.1880，兩者之間差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。Ptch-1在正常腦組織

8、組中相對表達量為0.3155±0.1314。正常腦組織組與低級別膠質瘤組及高級別膠質瘤組之間相對表達量差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。Smo的相對表達量在低級別膠質瘤組中為0.4976±0.1039，高級別膠質瘤組為0.6477±0.1730，二者之間的差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。正常腦組織中 Smo相對表達量為0.2703±0.0914。正常腦組織組與低級別膠質瘤組和高級別膠質瘤組之間的相對表達量差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.

9、05）。
　　4.Ptch-1和Smo蛋白相關性統(tǒng)計：在qRT-PCR實驗中，Ptch-1和Smo蛋白的相關系數為：R=0.514（P＜0.05）；在Western Blot實驗中，Ptch-1和Smo蛋白的相關系數為：R=0.655（P＜0.05）。
　　結論：
　　1.Ptch-1、Smo在膠質瘤及正常腦組織中均有表達，但在膠質瘤組織中表達水平顯著高于正常腦組織，提示SHH信號通路在膠質瘤中普遍處于激活狀態(tài)，其可能