TREK-1過表達與脈絡寧注射液對氧糖剝奪星形膠質細胞及其谷氨酸代謝的作用.pdf

1、目的：觀察雙孔鉀通道TREK-1過表達及脈絡寧注射液對氧糖剝奪星型膠質細胞（astrocyte,Ast）存活率和谷氨酸（Glu）攝取能力的影響，探討TREK-1在Glu興奮性毒性中的調節(jié)作用。
　　方法：原代培養(yǎng)大鼠星形膠質細胞，運用DNA質粒轉染法構建星形膠質細胞TREK-1過表達模型，采用細胞氧糖剝奪（Oxygen Glucose Deprivation,OGD）模型，模擬體內腦缺血環(huán)境，實驗分為對照組、TREK-1過表達組、

2、脈絡寧注射液組，分別于氧糖剝奪2h、4h、6h、8h后，MTT法檢測細胞增殖率；FITC/Propidium Iodide雙染色法和Hoechast33258染色法檢測細胞凋亡；Glu檢測試劑盒法檢測細胞攝取率；RT-PCR法檢測Glu特異性轉運體GLT-1、嘌呤能受體P2X7、谷氨酰胺合酶(GS)、凋亡信號因子Caspase-3和TREK-1通道的表達變化。
　　結果：
　　1.運用大鼠TREK-1 DNA重組質粒轉染星形

3、膠質細胞，TREK-1過表達模型構建成功；
　　2.在生理條件下，TREK-1過表達及脈絡寧液對星形膠質細胞活性無明顯影響，而在氧糖剝奪后，TREK-1過表達及脈絡寧注射液均能降低其細胞凋亡率；
　　3.氧糖剝奪星形膠質細胞的Glu攝取能力代償性增強，TREK-1過表達、脈絡寧注射液干預，二者均能增強均能增強其Glu攝取能力；
　　4.TREK-1過表達及脈絡寧注射液均可提高氧糖剝奪模型星形膠質細胞的GLT-1、GS、