桂枝茯苓丸對(duì)PID模型大鼠不同階段炎性細(xì)胞因子及粘連相關(guān)免疫分子變化的影響.pdf

1、目的：通過觀察桂枝茯苓丸對(duì)PID模型大鼠不同階段炎性細(xì)胞因子及粘連相關(guān)免疫分子變化的影響，為指導(dǎo)臨床用藥時(shí)間段及用藥方法的選擇提供理論依據(jù)。
　　方法：選用SPF級(jí)雌性未孕SD大鼠建立PID模型，采用機(jī)械性損傷子宮內(nèi)膜加細(xì)菌感染法，將198只大鼠隨機(jī)分為8組：假手術(shù)組及空白組；模型組、治療組（桂枝茯苓丸高、中、低劑量組）、對(duì)照組（金剛藤組及甲硝唑組）。藥物分別干預(yù)7天、14天、21天后，隨機(jī)抽取不同時(shí)間段各組大鼠，稱重，采取大鼠血

2、液；摘取子宮組織和卵巢組織，肉眼觀察后進(jìn)行稱重，分別計(jì)算兩者的指數(shù)；不同時(shí)間段各組大鼠血清中的前炎性細(xì)胞因子白介素-8（IL-8）和抗炎性細(xì)胞因子白介素-10（IL-10）都通過運(yùn)用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA法）來測(cè)定；在光學(xué)顯微鏡下觀察子宮組織不同時(shí)間段的病理變化；子宮組織中不同時(shí)間段免疫分子基質(zhì)金屬蛋白酶-9（MMP-9）和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）的陽性表達(dá)使用免疫組化法（S-P法）進(jìn)行檢測(cè)。
　　結(jié)果：
　　1.模

3、型大鼠出現(xiàn)了類似寒濕瘀阻證候的表現(xiàn)，與空白組、假手術(shù)組比較有差異，不同藥物干預(yù)后，各模型組大鼠在不同時(shí)間段的一般情況均有所改善。
　　2.模型組與空白組、假手術(shù)組比較，體重增加，藥物干預(yù)后各組在不同時(shí)間段的體重有所降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），以第21天桂枝茯苓丸高劑量組顯著（P＜0.05），不同時(shí)間段各組內(nèi)比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。
　　3.模型組的子宮指數(shù)、卵巢指數(shù)均有所降低，與空白組及假手術(shù)組比較有統(tǒng)

4、計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；與模型組相比較，藥物干預(yù)后在第7、14、21天的子宮指數(shù)、卵巢指數(shù)均有不同程度的升高，其變化均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。各組內(nèi)比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。
　　4.模型組的IL-8水平升高、IL-10水平降低，兩者關(guān)系呈負(fù)相關(guān)發(fā)展。與空白組及假手術(shù)組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，在不同藥物干預(yù)后，其IL-8呈降低趨勢(shì)，IL-10呈升高趨勢(shì)，不同時(shí)間段各用藥組最終恢復(fù)，接近于正

5、常水平，尤以桂枝茯苓丸中劑量組較為明顯（P＜0.05）。
　　5.不同時(shí)間段模型組的大鼠子宮內(nèi)膜均有異常變化。主要表現(xiàn)為：大部分上皮細(xì)胞在第7天時(shí)有壞死脫落，淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞等炎性細(xì)胞的浸潤，子宮內(nèi)膜充血，有明顯擴(kuò)張的血管；第14天時(shí)子宮內(nèi)膜結(jié)構(gòu)不清，排列紊亂，結(jié)締組織增生，宮腔大量分泌物；第21天時(shí)肌纖維紋理紊亂，部分腺體壞死并被纖維結(jié)締組織填充，宮腔內(nèi)可見大量的分泌物，用藥后各組表現(xiàn)均有改善。
　　6.不同時(shí)間段各模型

6、組VEGF表達(dá)呈逐漸升高趨勢(shì)，與空白組、假手術(shù)組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。藥物干預(yù)后，與模型組比較，不同時(shí)間段VEGF均有所降低，但第7天時(shí)桂枝茯苓丸中劑量組、金剛藤組明顯（P＜0.05）；桂枝茯苓丸中劑量組在第14天、21天時(shí)最顯著（P＜0.01）；藥物干預(yù)后不同時(shí)間段各組內(nèi)比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。
　　7.不同時(shí)間段各模型組的MMP-9表達(dá)呈逐漸升高的趨向，與空白組及假手術(shù)組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；

7、與模型組比較，藥物干預(yù)后，除第21天的金剛藤組、甲硝唑組外，其余各用藥組MMP-9均有一定程度的降低（P＜0.05）；桂枝茯苓丸高劑量組在第7天時(shí)降低MMP-9的表達(dá)最明顯（P＜0.01）；而桂枝茯苓丸中劑量組在第14天、21時(shí)天降低MMP-9最顯著（P＜0.01）；不同時(shí)間段用藥后兩者的表達(dá)在各組組內(nèi)比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.桂枝茯苓丸通過溫經(jīng)活血化瘀法，除改善不同時(shí)間段大鼠的一般情況、體重及

8、子宮、卵巢指數(shù)等外，還可改善子宮組織的病理形態(tài)，其中桂枝茯苓丸高劑量組作用顯著。可能通過調(diào)節(jié)大鼠體內(nèi)功能、代謝的紊亂狀態(tài)達(dá)到治療效果。
　　2.第7天時(shí)PID模型大鼠尚處于急性發(fā)作期，清熱解毒法及抗生素治療明顯；第14天后進(jìn)入慢性期，桂枝茯苓丸通過溫經(jīng)活血化瘀法可以有效的調(diào)節(jié)慢性期IL-8、IL-10的發(fā)展趨勢(shì)，可能通過升高PID慢性期抗炎性細(xì)胞因子、降低前炎性細(xì)胞因子的表達(dá)來治療PID，進(jìn)而降低PID進(jìn)一步發(fā)展或惡化的可能性。<