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文檔簡介
1、目的:
本文以小鼠巨噬細胞系(RAW264.7)為研究對象,人源氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)孵育細胞,探討纖維連接蛋白(Fibronectin,FN)是否通過誘導(dǎo)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(ERS)影響oxLDL作用下泡沫細胞的形成。
方法:
人源ox-LDL孵育RAW264.7細胞,western blot檢測FN、葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白-78(GRP78/bip)的表達,RT-PCR檢測FN基因表達水平變化;Western
2、 blot檢測FN基因沉默及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激抑制劑 PBA在ox-LDL誘導(dǎo)細胞后FN、GRP78/bip蛋白的表達變化;ELISA檢測ox-LDL孵育后細胞培養(yǎng)液中FN的含量;免疫熒光法檢測FN沉默后細胞對ox-LDL的體外攝取情況。
結(jié)果:
人源ox-LDL孵育RAW264.7細胞12h后FN和GRP78/bip蛋白表達水平上調(diào)(P<0.05),F(xiàn)N基因表達上調(diào)(P<0.05);加入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激抑制劑PBA孵育細胞6h再
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