β-NGF對過氧化氫損傷血管內皮細胞的保護作用.pdf

1、目的：本研究以人臍靜脈血管內皮細胞為研究對象，利用過氧化氫(H2O2)誘導其氧化損傷構建損傷模型，進而研究β-NGF對血管內皮細胞的保護作用及其機制。
　　方法：離體培養(yǎng)人臍靜脈血管內皮細胞（HUVECs），建立H2O2致HUVECs損傷模型后，利用低、高不同濃度濃度為1、10、100M的β-NGF處理氧化損傷的HUVECs細胞，同時設置未氧化損傷對照組和損傷后PBS對照組。MTT方法測定各組HUVECs細胞活力變化；流式細胞術檢

2、測各組細胞的凋亡率和活性氧ROS含量變化；觀察各組HUVECs細胞中丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽（GSH）的含量變化;同時檢測各組HUVECs細胞中處理不同時間內皮素（ET-1）和一氧化氮（NO）分泌含量變化；Western-blot方法檢測各組HUVECs細胞中TrkA、p75NTR及caspase-3蛋白的表達變化。
　　結果：H2O2誘導HUVECs氧化損傷后，與未損傷對照組相比，氧化損傷后PBS對照

3、組 HUVECs細胞活力顯著下降；而細胞凋亡率和產生 ROS含量均顯著上升；細胞產生MDA含量顯著上升，而SOD和GSH活性顯著下降；細胞中分泌ET-1含量顯著上升而NO分泌量顯著下降；但與氧化損傷后PBS對照組相比，1、10?M的β-NGF處理組的HUVECs細胞活力均顯著上升；而 HUVECs細胞凋亡率和產生 ROS含量均顯著下降；MDA量顯著下降，SOD和GSH活性顯著上升；ET-1分泌含量逐漸下降而 NO分泌含量逐漸上升，且均具

4、有統(tǒng)計學意義。同時Western-blot檢測發(fā)現(xiàn)1、10、100M的β-NGF處理均可以顯著誘導TrkA表達，進而抑制caspase-3的表達，但對p75NTR表達影響不明顯。
　　結論：本課題研究發(fā)現(xiàn)β-NGF可以提升H2O2氧化損傷HUVECs后的細胞活力，并降低細胞凋亡率和ROS產生，并能夠降低HUVECs細胞中MDA含量，增加SOD和GSH分泌量從而提升HUVECs細胞抵抗氧化損傷能力，降低內皮素ET-1的分泌量并提升N