Ⅰ、Ⅲ型膠原在男性腹股溝疝患者腹直肌前鞘中的表達(dá)及分析.pdf

1、背景與目的：
　　 腹股溝疝是普外科的常見(jiàn)病、多發(fā)病,其患病率為3‰～5‰[1]。人們對(duì)于腹股溝疝發(fā)病機(jī)制的研究已有幾百年的歷史,曾試圖從解剖學(xué)基礎(chǔ)、鞘狀突未閉、精索脂肪瘤、腹內(nèi)壓增高等方面來(lái)解釋腹股溝疝的發(fā)病原因。但到目前仍未能找到腹股溝疝發(fā)生的確切因素。近年來(lái)有國(guó)外學(xué)者從生物化學(xué)的角度提出了膠原代謝紊亂可能是腹股溝疝發(fā)生的重要原因,該學(xué)說(shuō)[2]認(rèn)為:在腹股溝疝患者結(jié)締組織中,Ⅰ型膠原蛋白減少,Ⅲ型相對(duì)增多,兩種膠原蛋白比例降

2、低,導(dǎo)致膠原代謝紊亂,引起腹股溝疝的發(fā)生。這一學(xué)說(shuō)目前基本得到了國(guó)內(nèi)外學(xué)者的認(rèn)可。
　　 在臨床工作中發(fā)現(xiàn),隨著年齡的增大,腹股溝疝患者增多,特別是60歲以后男性患者發(fā)病率明顯增高。目前,在國(guó)內(nèi)外對(duì)膠原代謝與腹股溝疝患者年齡的關(guān)系研究報(bào)道甚少。本研究通過(guò)免疫組化的方法檢測(cè)腹股溝疝患者不同年齡組Ⅰ、Ⅲ型膠原蛋白的含量,分析這兩種膠原在不同年齡組的表達(dá)水平,探討Ⅰ、Ⅲ型膠原蛋白代謝與年齡的關(guān)系,為腹股溝疝發(fā)生發(fā)展的病因研究及臨床治療

3、提供理論依據(jù)。本研究在國(guó)內(nèi)外尚屬首例。
　　 材料與方法：
　　 1.實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
　　 實(shí)驗(yàn)組:原發(fā)性腹股溝疝患者60例,根據(jù)不同年齡段設(shè)計(jì)為3組。其中實(shí)驗(yàn)1組20例,年齡為50～59歲;實(shí)驗(yàn)2組20例,年齡為60～69歲;實(shí)驗(yàn)3組20例,年齡為≥70歲。
　　 對(duì)照組:無(wú)腹股溝疝患者20例,年齡為50～80歲。
　　 實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組于2011年05月至08月同時(shí)取材于鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院,均為男性

4、患者,取材部位為下腹部腹直肌前鞘,面積為10mm*5mm。取材后立即浸泡于10％福爾馬林液體中固定。
　　 排除標(biāo)準(zhǔn):實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組均排除正在接受激素或其他免疫抑制劑治療患者、化療患者、糖尿病患者、低蛋白血癥患者、局部炎癥史者、結(jié)締組織病患者等。
　　 2.實(shí)驗(yàn)方法
　　 方法:采用免疫組化SP法。膠原含量用積分光密度值相對(duì)定量表示。
　　 試劑:兔抗人Ⅰ型膠原多克隆抗體(美國(guó)SANTACRUZ生物制劑公

5、司),兔抗人Ⅲ型膠原多克隆抗體(美國(guó)SANTA CRUZ生物制劑公司),SP9000試劑盒(北京中杉生物工程公司),DAB試劑盒(北京中杉生物工程公司)。
　　 3.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
　　 所得結(jié)果以均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件包。兩組均數(shù)的比較采用t檢驗(yàn),兩組以上均數(shù)的比較采用單因素方差分析(ANVOA)。P值<0.05,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果：
　　 1.Ⅰ型膠

6、原蛋白的表達(dá):
　　 對(duì)照組為156.02±11.37。
　　 實(shí)驗(yàn)1組為135.04±2.57,較對(duì)照組明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.005<0.05)。
　　 實(shí)驗(yàn)2組為128.77±1.85,較對(duì)照組明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.001<0.05)。
　　 實(shí)驗(yàn)3組為112.46±7.23,較對(duì)照組明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.000<0.05)。
　　 實(shí)驗(yàn)1組>實(shí)驗(yàn)2組

7、>實(shí)驗(yàn)3組。各實(shí)驗(yàn)組之間兩兩比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.05)。
　　 實(shí)驗(yàn)組(60例)與對(duì)照組相比,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.001<0.05)。
　　 2.Ⅲ型膠原蛋白的表達(dá):
　　 對(duì)照組為116.21±7.80。
　　 實(shí)驗(yàn)1組為128.97±3.46,較對(duì)照組明顯增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.032<0.05)。
　　 實(shí)驗(yàn)2組為132.58±2.41,較對(duì)照組明顯增高,差異有

8、統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.001<0.05)。
　　 實(shí)驗(yàn)3組為149.97±6.39,較對(duì)照組明顯增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.016<0.05)。
　　 實(shí)驗(yàn)1組<實(shí)驗(yàn)2組<實(shí)驗(yàn)3組。各實(shí)驗(yàn)組之間兩兩比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.05)。
　　 實(shí)驗(yàn)組(60例)與對(duì)照組相比,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.023<0.05)。3.Ⅰ/Ⅲ型膠原蛋白比例:
　　 對(duì)照組為1.35±0.12。
　　 實(shí)

9、驗(yàn)1組為1.05±0.02,較對(duì)照組明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.021<0.05)。
　　 實(shí)驗(yàn)2組為0.97±0.02,較對(duì)照組明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.025<0.05)。
　　 實(shí)驗(yàn)3組為0.75±0.06,較對(duì)照組明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.001<0.05)。
　　 實(shí)驗(yàn)1組>實(shí)驗(yàn)2組>實(shí)驗(yàn)3組。各實(shí)驗(yàn)組之間兩兩比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.05)。
　　 實(shí)驗(yàn)組

10、(60例)與對(duì)照組相比,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.018<0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 1.腹股溝疝患者腹直肌前鞘中隨著年齡的增大,Ⅰ型膠原蛋白逐漸減少,Ⅲ型膠原蛋白逐漸增高,Ⅰ/Ⅲ型膠原比例下降,膠原代謝紊亂加重,可能是老年患者年齡越大,腹股溝疝發(fā)病率越高的原因。
　　 2.本實(shí)驗(yàn)表明,腹股溝疝患者存在著明顯的膠原代謝紊亂。據(jù)此可以推斷,利用自身組織的傳統(tǒng)疝修補(bǔ)術(shù)不是理想的手術(shù)方式,采用人工材料的無(wú)張力修補(bǔ)