運(yùn)動對AMPK不同基因型小鼠骨骼肌MEF2-GLUT4的影響.pdf

1、大量研究表明MEF2是GLUT4蛋白轉(zhuǎn)錄過程的必需因子，運(yùn)動通過提高M(jìn)EF2/GLUT4 DNA結(jié)合活性而提高GLUT4基因和蛋白的表達(dá)，但機(jī)制尚不清楚。
　　目的：
　　本文旨在通過研究四周耐力訓(xùn)練對AMPKα2高表達(dá)轉(zhuǎn)基因和AMPKα2基因敲除鼠，骨骼肌總MEF2含量，核內(nèi)MEF2含量，MEF2/GLUT4 DNA結(jié)合活性以及GLUT4表達(dá)的影響，探討運(yùn)動提高骨骼肌MEF2/GLUT4 DNA結(jié)合活性及GLUT4基因和蛋

2、白的表達(dá)可能機(jī)制。
　　方法：
　　C57BL/6J野生小鼠、AMPKα2高表達(dá)轉(zhuǎn)基因和AMPKα2基因敲除鼠各20只，按體重各隨機(jī)分為2組：安靜對照組，耐力訓(xùn)練組，共6組，每組10只。耐力訓(xùn)練組小鼠訓(xùn)練設(shè)計(jì)為0坡度跑臺運(yùn)動，跑臺速度為12m/min，每天訓(xùn)練一個(gè)小時(shí)，每周六天，持續(xù)四周。訓(xùn)練組小鼠最后一次訓(xùn)練后12小時(shí)取材。Western blot法測定AMPK（THr72）磷酸化水平、總MEF2、核內(nèi)MEF2、GLUT4

3、蛋白含量。CHIP法測定MEF2/GLUT4 DNA結(jié)合活性。Real-Time PCR法測定GLUT4mRNA含量。
　　結(jié)果：
　　野生鼠四周耐力訓(xùn)練后，GLUT4基因表達(dá)量顯著增加的同時(shí)伴隨著MEF2/GLUT4 DNA結(jié)合活性的顯著增加，為運(yùn)動通過提高M(jìn)EF2 DNA結(jié)合活性而提高GLUT4表達(dá)提供了進(jìn)一步的證據(jù)。AMPKα2高表達(dá)轉(zhuǎn)基因鼠四周耐力訓(xùn)練后，AMPKα(THr172)磷酸化水平，核內(nèi)MEF2蛋白表達(dá)，M

4、EF2/GLUT4 DNA結(jié)合活性，GLUT4基因和蛋白表達(dá)量均顯著高于野生鼠，提示了“運(yùn)動- AMPK激活-核內(nèi)MEF2表達(dá)增多-MEF2-GLUT4DNA結(jié)合活性增加-GLUT4基因和蛋白表達(dá)增多”這樣一條通路的存在。雖然四周耐力訓(xùn)練后AMPKα2基因敲除小鼠AMPKα(THr172)磷酸化水平及核內(nèi)MEF2含量均顯著低于野生鼠，但MEF2/GLUT4 DNA結(jié)合活性以及GLUT4基因和蛋白含量與野生鼠相比無顯著差異，提示了在AMP