保留殘跡重建前交叉韌帶對移植物重塑影響的組織學研究.pdf

1、目的:
　　 通過重建前交叉韌帶(ACL)動物模型的建立,對比研究保留ACL殘跡與切除殘跡對移植物愈合與膠原表型的影響,并探討產生這些影響的原因,為臨床保留殘跡重建ACL的手術方法提供理論依據。
　　 方法:
　　 1.實驗處理:
　　 取36只成年新西蘭大白兔,其中4只做為正常對照組。其余32只為實驗動物,隨機分為4組,每組8只。切斷兔雙側ACL,左側保留ACL殘跡,右側不予保留,取同側自體跟腱作為移植

2、腱,行ACL重建術。分別于術后6、12、18、24周觀察膝關節(jié)功能并取材。
　　 2.觀察指標:
　　 2.1膝關節(jié)大體觀察評分:術后觀察膝關節(jié)主動、被動活動,關節(jié)穩(wěn)定性等情況。
　　 2.2組織學觀察:4組標本分關節(jié)腔內段和脛骨隧道內段兩部分觀察。
　　 2.2.1關節(jié)腔內段:4％多聚甲醛固定、包埋、切片后行HE染色、苦味酸-天狼猩紅染色及Ⅲ型膠原免疫熒光染色,觀察成纖維細胞密度、膠原表型及組織學情況。

3、
　　 2.2.2脛骨隧道內段:10％EDTA-Na2脫鈣、包埋、切片后HE染色、甲苯胺藍染色,觀察腱-骨愈合情況。
　　 3.統(tǒng)計學分析:采用SPSS16.0軟件進行統(tǒng)計分析。
　　 結果:
　　 1.術后膝關節(jié)大體觀察評分:
　　 各時間段保留殘跡組膝關節(jié)大體觀察評分均高于切除殘跡組,差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);各處理組不同時間段間比較,差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05);是否保留殘跡與時

4、間之間不存在交互作用(P＞0.05)。
　　 2.關節(jié)腔內段:
　　 HE染色:各時間段保留殘跡組組織學表現(xiàn)均優(yōu)于切除殘跡組。各時間段保留殘跡組成纖維細胞密度均高于切除殘跡組,差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);各處理組不同時間段間比較,12周時均高于6、18、24周,差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);是否保留殘跡與時間之間不存在交互作用(P＞0.05)。
　　 天狼猩紅染色:各時間段保留殘跡組Ⅲ型膠原所占Ⅰ、Ⅲ型

5、膠原纖維總面積的百分比均高于切除殘跡組,差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);各處理組不同時間段間比較,12周時均高于6、18、24周,差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);24周時各處理組分別與正常跟腱比較,差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05),說明移植腱需經歷膠原塑形改建、重新“韌帶化”過程;24周時各處理組分別與正常ACL比較,差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05),說明移植腱與正常ACL組織學存在差異,膠原塑形過程均未完成。
　　 Ⅲ型膠

6、原免疫熒光染色:各時間段保留殘跡組Ⅲ型膠原熒光表達量均高于切除殘跡組,差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);各處理組不同時間段間比較,12周時均高于6、18、24周,差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);是否保留殘跡與時間之間不存在交互作用(P＞0.05)。
　　 3.脛骨隧道內段:
　　 HE、甲苯胺藍染色:各時間段保留殘跡組移植腱與脛骨隧道間愈合的組織學表現(xiàn)、軟骨細胞的異染性均優(yōu)于切除殘跡組。切除殘跡組腱-骨愈合過程延遲于保