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文檔簡介
1、低聚果糖具有顯著的營養(yǎng)和保健功能。研究菊粉內切酶水解菊粉生產低聚果糖,選育菊粉內切酶高產菌株,是功能性低聚糖研究中的熱點課題。
本文的工作內容和研究成果主要有以下方面:
①產菊粉內切酶菌株的分離篩選及鑒定:從西北農林科技大學生物園土壤中采樣,以菊粉為底物,松三糖為選擇性鑒別碳源,平板分離純化出6株產菊粉內切酶菌株。以酶活I/S值作為復篩標準,篩選出2株產菊粉內切酶酶活相對較高的菌株,標記為NCM和NSY5,它
2、們的搖瓶初始酶活I/S值分別為17.82,12.40。通過菌落形態(tài)、菌絲及孢子形態(tài)以及生理生化特性分析,初步鑒定命名為:柱隔孢霉Ramularia NCM和克魯維酵母Kluveromyces NSY5。
②發(fā)酵條件優(yōu)化研究:在單因素實驗基礎上,采用Plackett-Burman實驗設計對影響Kluveromyces NSY5發(fā)酵產菊粉內切酶的碳源、氮源、無機鹽、發(fā)酵時間等8個選擇因素進行評估,結果顯示培養(yǎng)基的菊芋汁濃度、搖
3、瓶裝液量和發(fā)酵時間對菌株發(fā)酵產酶具有顯著影響。根據(jù)實驗結果和經驗方法對顯著影響因素的優(yōu)化取值范圍進行預估,用Box-Behnken中心組合實驗和響應面尋優(yōu)分析找出顯著影響因素的極優(yōu)值,驗證實驗結果顯示,采用優(yōu)化的菊芋汁濃度3.5％、裝液量50ml/250ml、發(fā)酵時間56h,Kluveromyces NSY5搖瓶發(fā)酵液中的菊粉內切酶I/S值達到18.29,比初始發(fā)酵條件下的菊粉內切酶I/S值12.40提高47.50％,優(yōu)化預測值和實驗驗
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