miR21對宮頸癌Siha細(xì)胞順鉑敏感性的影響.pdf

1、目的：
　　研究miR21的表達(dá)對宮頸癌Siha細(xì)胞順鉑敏感性的影響及影響機(jī)制，為宮頸癌的有效治療提供理論依據(jù)。
　　方法：
　　實驗分四組進(jìn)行，miR21下調(diào)組、miR21上調(diào)組、陰性對照組及空白對照組，實時熒光定量 PCR檢測轉(zhuǎn)染后各組細(xì)胞中miR21基因的表達(dá)水平；cck-8比色法檢測各組細(xì)胞對順鉑的 IC50值；Annexin V/PI法檢測順鉑處理后各組細(xì)胞的凋亡率；實時熒光定量 PCR和蛋白印跡法分別從 m

2、RNA和蛋白水平檢測順鉑對各組細(xì)胞中PTEN、PDCD4的影響。
　　結(jié)果：
　　1、qRT-PCR檢測轉(zhuǎn)染后各組細(xì)胞中miR21的表達(dá)水平結(jié)果顯示：下調(diào)組miR21的表達(dá)明顯低于陰性對照組，上調(diào)組 miR21的表達(dá)明顯高于陰性對照組。
　　2、cck-8比色法實驗結(jié)果顯示：順鉑對下調(diào)組的 IC50值為（2.44±0.69） ug/ml，顯著低于陰性對照組細(xì)胞（3.96±0.07）ug/ml；上調(diào)組細(xì)胞（6.93±0.

3、07） ug/ml顯著高于陰性對照組細(xì)胞。
　　3、Annexin V/PI法實驗結(jié)果顯示：5ug/ml順鉑誘導(dǎo)下調(diào)組的凋亡率為（64.36±2.47）％，顯著高于陰性對照組細(xì)胞（4.2±0.17）%；5ug/ml順鉑誘導(dǎo)上調(diào)組細(xì)胞（0.06±0.03）%顯著低于陰性對照組細(xì)胞（4.2±0.17）%。
　　4、qRT-PCR檢測 PTEN、PDCD4實驗結(jié)果顯示：下調(diào) miR21在細(xì)胞的表達(dá)后 PTEN、PDCD4的 mRN

4、A表達(dá)顯著高于陰性對照組，上調(diào) miR21在細(xì)胞的表達(dá)后PTEN、PDCD4的mRNA表達(dá)明顯低于陰性對照組。
　　5、蛋白質(zhì)印跡法（western blot）檢測PTEN、PDCD4實驗結(jié)果顯示：下調(diào)miR21在細(xì)胞的表達(dá)后 PTEN、PDCD4的蛋白表達(dá)顯著高于陰性對照組，上調(diào)miR21在細(xì)胞的表達(dá)后PTEN、PDCD4的蛋白表達(dá)明顯低于陰性對照組。
　　結(jié)論：
　　基因轉(zhuǎn)染技術(shù)能有效上調(diào)或下調(diào)宮頸癌細(xì)胞系Siha