內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激在糖尿病腎病足細(xì)胞損傷中的作用研究.pdf

1、背景
　　 在我國(guó)，糖尿病腎?。―iabetic nephropathy，DN）已上升至終末期腎?。╡nd stagerenal disease，ESRD）病因的第二位，其發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，至今未得到全面的認(rèn)識(shí)。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激（endoplasmic reticulum stress，ERS）為細(xì)胞應(yīng)激狀態(tài)下，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)所做出的分子學(xué)上的級(jí)聯(lián)反應(yīng)，它可以緩沖環(huán)境壓力，保護(hù)細(xì)胞。如果ERS持續(xù)存在，則可誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。近年來(lái)大量研究提示ERS可

2、能在DN的發(fā)病中占據(jù)了重要的地位，但在DN早期即發(fā)生的足細(xì)胞損傷中，ERS所發(fā)揮的作用仍罕有報(bào)道。
　　 目的
　　 探討內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激在早期糖尿病腎病足細(xì)胞損傷中的作用。
　　 方法：
　　 以C57BLKS db/db糖尿病小鼠為研究對(duì)象，分成6周、9周和12周3組，每組db/db小鼠7只，db/m小鼠5只。通過(guò)PASM染色分析比較各組小鼠的系膜面積，wt-1免疫組化檢測(cè)足細(xì)胞密度變化，激光共聚焦檢測(cè)sy

3、naptopodin和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)伴侶蛋白糖調(diào)節(jié)蛋白78（Glucose-reguiated protein78，GRP78）標(biāo)記的腎組織內(nèi)足細(xì)胞的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激狀態(tài)，TUNEL方法檢測(cè)腎組織細(xì)胞凋亡狀態(tài)。激光共聚焦法檢測(cè)游離棕櫚酸鹽刺激下足細(xì)胞內(nèi)GRP78的水平。
　　 結(jié)果：
　　 （1）9劇齡db/db小鼠較9周齡db/m小鼠已出現(xiàn)明顯系膜基質(zhì)增生，部分12周齡db/db小鼠系膜基質(zhì)增生更加顯著，在db/db小鼠腎組織中檢測(cè)

4、出ERS蛋白GRP78的表達(dá)高于db/m小鼠，且GRP78的分布和足細(xì)胞的分布相似。從6周齡到12周齡，GRP78在db/db小鼠足細(xì)胞的表達(dá)增強(qiáng)。研究小鼠。腎組織未檢測(cè)出明顯凋亡，且db/db與db/m兩組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，p>0.05。（2）棕櫚酸鹽刺激下，體外培養(yǎng)的足細(xì)胞內(nèi)GRP78較對(duì)照組升高，細(xì)胞密度減小。
　　 結(jié)論：
　　 （1）在早期的糖尿病腎病小鼠模型中，隨蛋白尿出現(xiàn)和增加，系膜基質(zhì)增生，足細(xì)胞中也出現(xiàn)內(nèi)