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文檔簡介
1、目的:以青年昆明小鼠為研究對象,注射D-半乳糖制備小鼠急性致衰老模型,對模型小鼠加以運動訓練,觀察運動對模型組小鼠的衰老狀態(tài)的改善情況,并證明適量運動可促進急性致衰小鼠SVZ相關區(qū)域的神經(jīng)發(fā)生。
方法:選取1月齡雄性昆明小鼠40只,體重在20-25g,隨機分為4組,每組10只。分別是對照組,對照運動組(對運組),模型組和模型運動組(模運組)。模運組小鼠每天注射D-半乳糖125mg/kg,連續(xù)8周,使其急性致衰。對運組和模運組小
2、鼠每天進行適量強度的跑步運動,連續(xù)運動8周。打藥和運動同步進行。Morris水迷宮試驗:待給藥及運動因素結束后,小鼠于迷宮實驗室環(huán)境下飼養(yǎng)1天,開始定位航行試驗,通過小鼠的上臺潛伏期考察小鼠學習能力,平臺放入水迷宮4個象限中的一個,其相鄰兩個象限的中點和對側象限邊緣兩個點(共4個)為小鼠入水點,依次從這四個點將小鼠面向池壁放入水中,視頻采集系統(tǒng)跟蹤并記錄找到平臺所需的時間和軌跡。5天后撤去平臺進行空間探索實驗,記錄小鼠60s內(nèi)跨越平臺的
3、次數(shù)來評判其記憶能力。組織切片制備及觀察:水迷宮實驗結束后,將輸液針刺入小鼠左心室,同時剪開右心耳,用生理鹽水沖洗,4%多聚甲醛灌注。取腦組織,制備石蠟切片,挑選SVZ相關區(qū)域(包括部分SVZ區(qū)和部分吻側遷移流)的石蠟切片,分別進行HE染色,以及Sox-2、Ki-67和DCX免疫組化染色。
結果:⑴Morris水迷宮實驗結果:各組定位巡航試驗的潛伏期存在差異(P<0.05):對照組短于模型組,模運組短于模型組,甚至短于對照組(
4、P<0.05)。運動組短于模型組(P<0.05),對運組小鼠的定位巡航時間短于對照組小鼠(P<0.05)。模運組穿越平臺次數(shù)多于模型組(P<0.05),對運組穿越平臺次數(shù)多于對照組(P<0.05),模型組小鼠穿臺次數(shù)低于對照組,但無統(tǒng)計學差異(P>0.05);⑵HE染色結果顯示:對照組和對運組皮質(zhì)區(qū)神經(jīng)細胞排列整齊,染色均勻,形態(tài)良好,而模型組和模運組細胞數(shù)量減少,有較多細胞出現(xiàn)核深染、核固縮現(xiàn)象。模型組和模運組的變性細胞比例均顯著高于
5、對照組(P<0.05),模運組變性細胞比例低于模型組(P<0.05),對運組變性細胞比例低于對照組(P<0.05);⑶Sox-2、Ki-67和DCX免疫組化染色結果:計數(shù) SVZ區(qū)相關區(qū)域的Sox-2、Ki-67和DCX陽性細胞數(shù)發(fā)現(xiàn),模型組三組染色陽性細胞數(shù)均少于對照組(P<0.05),模運組三組染色陽性細胞數(shù)均高于模型組(P<0.05),Ki-67和Sox-2陽性細胞數(shù)甚至高于正常組小鼠水平(P<0.05),對運組小鼠的陽性細胞數(shù)多
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