內毒素激活大鼠枯否細胞及其對肝細胞損害機制的研究.pdf

1、目前,關于mCD14在參與LPS激活骨髓源性細胞(尤其是巨噬細胞和中性粒細胞)中的作用已有一些研究報道.研究表明mCD14在低濃度LPS激活巨噬細胞中是必需的;枯否氏細胞(KC)是體內最大的組織巨噬細胞群,由于其所處位置的特殊性,它可能具有一些不同于其它巨噬細胞的特征.因此,KC的激活及其功能性反應對局部肝組織甚至全身的損傷有十分重要的意義.迄今,關于LPS激活KC的分子機制及其確切的信號轉導途徑尚未完全清楚,近年有人認為LPS激活KC

2、并非mCD14依賴的,而與Toll受體介導有關.Toll是一種果蠅個體發(fā)育和先天性免疫所必需的基因.人細胞中Toll蛋白的類似物稱為Toll樣受體(TLRs).目前已克隆了6種人的TLRs,即TLR1~6.其中研究較多的是TLR2和TLR4.研究證實:TLR2和TLR4均能有效地作為LPS受體并參與細胞的激活,其中尤以TLR4更為重要.TLR4缺乏或突變小鼠的巨噬細胞不能參與LPS反應.然而,對TLRs的研究還有很多問題需要解決:諸如L

3、PS是直接作為TLRs的配體還是通過尚不知曉的方式產生配體來發(fā)揮其激活細胞的功能;TLRs介導細胞激活所引起的細胞內信號轉導途徑;TLRs的分布、合成及調節(jié)規(guī)律;TLRs與CD14的關系等.該實驗旨在應用細胞原代培養(yǎng)、光鏡和電鏡觀察、免疫組化、RT-PCR、圖像分析、放免分析等方法探討以下問題:(1)LPS對KC受體CD14和TLR4的調節(jié);(2)LPS激活KC后產生的活性介質對CD14和TLR4表達的影響;(3)絲裂源激活的蛋白激酶(