賴氨匹林對人宮頸癌Hela細胞的抑制作用及其機制.pdf

1、目的：研究非選擇性環(huán)氧合酶-2（cyclooxygenase-2，COX-2）抑制劑賴氨匹林(aspisol)對人宮頸癌 hela細胞增殖、凋亡的調控作用及其細胞外信號調節(jié)激酶1/2(extracellular signal-regulated kinase，ERK1/2)信號通路的影響。探討aspisol抗宮頸癌作用的可能機制，為拓寬aspisol的臨床應用范圍提供實驗佐證和理論依據(jù)。
　　方法：實驗分為陰性對照組、aspiso

2、l組（1、5、10 mmol?L-1）組和陽性藥組（U012610μmol?L-1）共五組。1、生長曲線測定及MTT比色法分析aspisol對人宮頸癌Hela細胞的抑制作用；2、標準細胞集落形成分析法測定aspisol對Hela細胞的細胞集落（克隆）形成的影響；3、HE染色觀察aspisol作用于人宮頸癌細胞Hela細胞后形態(tài)學的改變；4、流式細胞術結合Annexin V/PI雙染測定Hela細胞早期凋亡率；5、Western blot

3、方法檢測ERK1/2、P-ERK1/2和COX-2蛋白的表達。
　　結果：
　　1、aspisol各組均可抑制Hela細胞的生長，其作用具有濃度和時間依賴性，與對照組相比差異有顯著性(P<0.01)，aspisol10 mmol?L-1的濃度抑制率最大，在作用于Hela細胞72小時后抑制率可達到(59.1±3.14)％；
　　2、集落形成數(shù)量在 aspisol各用藥組與陰性對照組相比依次降低到(96.22±0.18)%

4、、(73.02±1.35)%、(48.17±2.05)%，aspiso（l mmol?L-1）與陰性對照組比較，差異無顯著性（P>0.05），aspisol（5、10 mmol?L-1）與陰性對照組比較，差異有顯著性（P<0.05）；
　　3、HE染色光鏡下見aspisol各組與陰性對照組相比細胞密度減小，細胞變圓，胞核染色變淺；
　　4、aspisol各組作用24 h后誘導Hela細胞早期凋亡率分別為(5.74±0.87)

5、%、(13.01±1.85)%、(23.42±3.12)%，aspiso（l mmol?L-1）與陰性對照組(0.46±0.69)%比較，差異無顯著性（P>0.05），aspisol(5、10 mmol?L-1)與陰性對照組比較，差異有顯著性(P<0.01)，并呈濃度依賴性；
　　5、aspisol可以下調P-ERK1/2及COX-2的表達水平(P<0.01)，但不影響總ERK表達(P>0.05)。
　　結論：
　　1

6、、aspisol可以抑制宮頸癌Hela細胞的增殖，誘導其凋亡；
　　2、Hela細胞中ERK1/2表達增多，aspisol呈濃度依賴性抑制Hela細胞ERK1/2活性；
　　3、Hela細胞中COX-2表達增高，aspisol呈濃度依賴性抑制Hela細胞COX-2表達；
　　4、Aspisol抑制Hela細胞增殖，誘導凋亡作用的機制可能與抑制ERK1/2的活化、進而下調COX-2的表達有關。
　　本文工作的主要創(chuàng)