溫莪術蛋白及葉片蛋白雙向電泳技術體系的初步研究.pdf

1、溫郁金是有著千年栽培歷史的浙江省地道中藥材，主產于浙江省溫州市瑞安一帶。溫郁金屬姜科姜黃屬，其地下塊莖俗稱莪術。研究證明：莪術油具有抗腫瘤、抗病毒細菌、抗凝血和保肝等多種作用。目前對莪術的研究主要是對其活性成分的化學成分分析、藥理活性及其在臨床上的應用，對植株的生理生態(tài)的研究尤其是生物學研究卻鮮有報道。 人類基因組計劃的完成標志著生命科學已進入后基因組時代，蛋白質組學的研究被提升到了前所未有的高度。蛋白質組的主要研究內容是通過其

2、三大核心技術一雙向電泳、生物質譜、生物信息學技術對全套蛋白質進行動態(tài)的探索，達到闡述生物體全部蛋白質的表達及功能模式的目的。 蛋白樣品的提取制備是影響雙向電泳的關鍵性因素。樣品中常含有核酸、脂、多糖、鹽等影響蛋白質的可溶性和雙向電泳重復性的物質，以植物樣品為甚，植物中還含有大量的色素、酚、醌及其它多種次生代謝產物，嚴重的影響提取效率以及干擾電泳結果，而且不同的植物、植物的不同器官往往差別比較大，更給樣品提取工作增加復雜性。因此，

3、對植物進行樣品提取研究探索，建立起相應的雙向電泳技術體系，將對該植物的進一步蛋白質組學研究突破技術瓶頸。 本研究分兩部分，分別對溫郁金的地下塊莖莪術及地上葉片進行了雙向電泳前樣品提取制備的探索研究，并建立了相應的雙向電泳技術體系。第一部分通過采用超聲破碎、TCA/丙酮沉淀法、超速離心等方法提取了溫莪術蛋白，并進行了7 cm和18 cm的雙向電泳，成功地建立了溫莪術的雙向電泳技術體系；第二部分，通過比較多種提取方案，篩選出兩種相對