重慶人IL-18及其受體基因啟動子多態(tài)性與結核易感性的關系.pdf

1、背景：結核病是由結核分枝桿菌(mycobacterium tuberculosis，MT)感染所致。近20年結核病在全球出現“復燃”趨勢，全世界人口結核感染率為33.3％，而我國人口結核感染率為44.5％，是全球22個結核病高負擔國家之一，結核病患者數位居全球第二。近五年重慶醫(yī)科大學附屬兒童醫(yī)院結核病住院人數明顯增加。 同卵雙胞胎同時患結核機會明顯大于異卵雙胞胎，不同種族之間結核感染率有差異，提示宿主遺傳背景影響著對結核的抵抗力

2、和易感性。作為第三代遺傳標記的單核苷酸多態(tài)性(SNP)直接以序列差異作為標記，比其他遺傳標記更能真實的反映人種、人群及個體之間的遺傳差異。所以，研究SNP與疾病的關系對研究疾病發(fā)生的遺傳學背景，探索人類疾病的新型防治措施有重要意義。結核病的防御機制主要是細胞免疫，其中TH1型細胞介導的免疫機制起關鍵作用，IFN-γ及其誘生因子IL-12、IL-18等均被認為是免疫防御結核菌的關鍵性角色。IL-18是一種新型IFN-γ誘生因子，能觸發(fā)自然

3、殺傷細胞(NK細胞)和TH1細胞產生IFN-γ，并促使TH1細胞、NK細胞增殖和發(fā)揮細胞毒活性。 IL-18基因多態(tài)性影響IL-18的表達：IL-18基因啟動子區(qū)域(起始密碼前)-137和-607位核苷酸存在單核苷酸多態(tài)性(SNP)，-137由G變?yōu)镃和-607由C變?yōu)锳將分別改變組蛋白H4基因獨特性轉錄因子(H4TF-1)和核因子cAMP應答元件結合蛋白的結合位點，影響它們與IL-18基因啟動子的結合能力，可能影響IL-18表

4、達水平，并進一步影響IFN-γ表達水平及TH1型細胞免疫功能。IL-18需與IL-18受體結合才能發(fā)揮生物學效應，因此，IL-18受體(由α、β異二聚體組成)表達水平也將影響IL-18誘導IFN-γ產生和抗結核感染效應。IL-18Rα，基因啟動子區(qū)-69和-638位核苷酸存在SNP，不同IL-18Rα SNP可能影響其表達水平。目前國內外尚未見IL-18及其受體α鏈(IL-18Rα)基因啟動子多態(tài)性與結核易感性的研究報道。 目的

5、：分析重慶兒童結核病人的臨床及輔助檢查特點；重點研究IL-18(-137G/C和-607C/A)及IL-18Rα(-69C/T和-638C/T)基因啟動子單核苷酸多態(tài)性(SNP)與重慶結核病發(fā)病的相關性；揭示其在重慶人結核易感性方面的影響。 方法：隨機選取重慶住院和門診隨訪確診的兒童結核91例和成人結核32例；健康兒童167名和健康成人82名作對照；對重慶兒童結核病臨床特點及輔助檢查進行回顧性分析；應用序列特異性引物-聚合酶聯反

6、應(PCR-SSP)法分析IL-18及其受體α鏈基因多態(tài)性。 結果： 1、重慶兒童結核中，發(fā)生結核性腦膜炎(結腦)的比率，有結核接觸史者明顯高于無結核接觸史者(P<0.05)。 2、未接種卡介苗的兒童結腦發(fā)病率高于接種了卡介苗的兒童。 3、重慶兒童結核PPD試驗陽性者中抗酸桿菌涂片陽性者明顯高于涂片陰性者(P<0.05)。 4、IL-18基因-137位多態(tài)性：結核患兒IL-18 -137位GG基因

7、型頻率明顯高于健康對照(P<0.05)，GC和CC基因型與健康對照比較均無明顯差別；等位基因C明顯低于健康對照(P<0.05)。成人結核-137位各基因型及等位基因頻率和健康成人比較無明顯差別(P>0.05)。總結核病人(兒童+成人)-137位GG基因型明顯高于總正常對照(兒童+成人)(P<0.05)，GC和CC基因型分布頻率和對照比較無明顯差別(P>0.05)；等位基因C明顯低于總正常對照(P<0.05)。 5、IL-18基因

8、-607位多態(tài)性：各結核病人組(兒童結核、成人結核及兒童+成人結核)IL-18 -607位各基因型和等位基因頻率和相應的正常對照比較均無明顯差異(P>0.05)。 6、IL-18Rα基因-69位多態(tài)性：結核患兒IL-18Rα-69位CC基因型明顯低于正常對照(P<0.01)， CT 和TT基因型頻率與正常對照比較無明顯差別；等位基因C明顯低于正常對照(P<0.01)。成人結核-69位各基因型及等位基因頻率與正常對照比較均無明顯差

9、別(P>0.05)。總結核病人(兒童+成人)-69位CC基因型明顯低于總正常對照(兒童+成人)(P<0.01)，TT基因型頻率明顯高于總正常對照(P<0.05)，CT基因型與正常對照比較無明顯差異(P>0.05)；總結核病人等位基因C明顯低于正常對照(P<0.01)；-69位等位基因頻率肺結核、肺外結核和肺結核+肺外結核三組比較有明顯差異(P<0.01)。 7、IL-18Rα基因-638位多態(tài)性：各結核病人組(兒童結核、成人結核

10、及兒童+成人結核)IL-18Rα-638位各基因型和等位基因頻率與正常對照比較均無明顯差異(P>0.05)。而結腦患兒等位基因C的頻率明顯低于其他結核，嚴重結核患兒等位基因C的頻率明顯低于一般結核組(P<0.01)。 結論： 1、目前預防小兒結核病尤其是結核性腦膜炎最重要的方法是防止小兒受到結核感染以及成功接種卡介苗。 2、重慶兒童結核PPD試驗陽性者中抗酸桿菌涂片(涂菌)陽性患兒明顯高于涂菌陰性者(P<0.05