奧曲肽抑制角膜新生血管形成的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：角膜的無(wú)血管化是角膜的主要特征。在感染、外傷及其他原因誘導(dǎo)下，可發(fā)生角膜新生血管(Comealneovascularization，CNV)，引起視力嚴(yán)重?fù)p害。 新生血管形成機(jī)制復(fù)雜，許多生長(zhǎng)因子和調(diào)節(jié)因子參與這一過(guò)程，并在血管生成和抑制之間形成動(dòng)態(tài)的平衡。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)大鼠堿燒傷誘導(dǎo)的角膜新生血管模型，觀察血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(Vascularendothelialgrowthfactor，VEGF)、色素上皮衍生因子(Pigm

2、entepitheliumderivnfactor，PEDF)和基質(zhì)金屬蛋白酶一2(Matrimetalloprdeinase-2，MMP-2)、基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子-2(TissueinhibitorofmetaUoproteinase-2，TIMP-2)在血管形成過(guò)程中的表達(dá)及動(dòng)態(tài)變化，探討作用機(jī)理，為臨床治療提供實(shí)驗(yàn)研究依據(jù)。 在我國(guó)，眼外傷(尤其是嚴(yán)重的眼化學(xué)傷)引起的角膜CNV是十分常見(jiàn)的眼病，約占眼表疾病的10％，

3、因此積極探索治療有效、副作用小的治療方法是有重要意義的。本實(shí)驗(yàn)采用生長(zhǎng)抑素類似物奧曲肽(Octreotide，Oct)治療大鼠角膜堿燒傷，觀察其在角膜新生血管形成中的作用，并探討藥物作用機(jī)制，為臨床上治療角膜堿燒傷提供新的思路。 方法：實(shí)驗(yàn)用Wistar大鼠42只隨機(jī)分為奧曲肽治療1、2、3組和對(duì)照組，余2只為正常對(duì)照，四個(gè)實(shí)驗(yàn)組大鼠雙眼均制成角膜中度堿燒傷模型。1、2、3治療組術(shù)后分別用0．001％、0．005％、0．01％奧

4、曲肽眼液滴眼，對(duì)照組以復(fù)方氯化鈉注射液滴眼，均為每日4次，每次1滴，連用7天。 堿燒傷術(shù)后在裂隙燈顯微鏡下觀察大鼠角膜混濁度；組織病理切片HE染色作微血管計(jì)數(shù)及多形核白細(xì)胞(PMN)計(jì)數(shù)；透射電鏡觀察超微結(jié)構(gòu)的改變；免疫組化檢測(cè)角膜VEGF、PEDF和MMP-2、TIMP-2的表達(dá)情況；測(cè)量每只大鼠體重。 結(jié)果：奧曲肽治療組在3、7、14、30天較對(duì)照組角膜混濁程度輕(P<0．05)；第14天形成的新生血管數(shù)量較對(duì)照組少

5、(P<0．05)；第1、3、7、14天角膜組織PMN細(xì)胞數(shù)較對(duì)照組少(P<0．05)。 VEGF、PEDF及MMP-2、TIMP-2在正常角膜組織的上皮細(xì)胞均有少量表達(dá)。堿燒傷術(shù)后，角膜VEGF的表達(dá)在3天時(shí)達(dá)到高峰，此后逐漸下降；MMP-2在7天時(shí)表達(dá)到頂點(diǎn)；PEDF和TIMP-2表達(dá)情況基本一致，7、14天表達(dá)逐漸增強(qiáng)，此后有所減弱。 奧曲肽治療組在3、7天時(shí)VEGF、MMP-2的表達(dá)低于對(duì)照組，3、7、14天PED

6、F及14天TIMP-2的表達(dá)高于對(duì)照組，有顯著性差異(P<0．05)。0．005％及0．01％奧曲肽治療組和對(duì)照組比較比0．001％組有顯著性差異的時(shí)程長(zhǎng)。 結(jié)論：VEGF、PEDF及MMP-2、TIMP-2均參與了角膜堿燒傷后新生血管增殖的調(diào)控，并在這一過(guò)程中發(fā)揮著重要的作用。奧曲肽通過(guò)抑制促血管生成因子VEGF、MMP-2的表達(dá)和增強(qiáng)抑制血管生成因子PEDF、TIMP-2的表達(dá)，及減輕白細(xì)胞浸潤(rùn)等途徑達(dá)到抑制角膜堿燒傷后新生