LC-MS-MS測(cè)定家兔血漿中利奈唑胺濃度及其藥代動(dòng)力學(xué).pdf

1、目的:
　　建立簡(jiǎn)單、靈敏的高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法/(LC-MS)，用于測(cè)定家兔血漿中利奈唑胺濃度，并應(yīng)用于其藥代動(dòng)力學(xué)相關(guān)研究，為指導(dǎo)臨床合理用藥提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法:
　　1、以高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法/(LC-MS)測(cè)定利奈唑胺在家兔血漿中的濃度，艾司唑侖作為內(nèi)標(biāo)，血漿樣品以乙腈作為提取溶劑和蛋白沉淀劑進(jìn)行提取分離。
　　2、色譜柱采用AgilentC18(2.1mm×50mm，3.5μm)
　

2、　柱溫:25℃
　　進(jìn)樣量:5μl
　　流速:0.4ml/min
　　流動(dòng)相:A（1％甲酸）和流動(dòng)相B（乙腈）梯度洗脫
　　0-2.0分鐘(90％→20％A、10％-80％B)
　　2.0-6.0分鐘(20％A、80％B)
　　6.0-7.0分鐘(20％→90％A、80％-10％B)
　　7.0-10.0分鐘(90％A、10％B)
　　毛細(xì)管電壓:3000V
　　干燥器溫度:350℃

3、
　　氮?dú)怏w流速:6L/min
　　霧化氣壓力:20psi
　　掃描時(shí)間:100ms
　　碎裂電壓:利奈唑胺(0.25v)、艾司唑侖(0.35v)
　　3、采用電噴霧離子源(ESI)，正離子檢測(cè)，多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(multiplereactionmonitoring，MRM)模式進(jìn)行定量分析利奈唑胺濃度，監(jiān)測(cè)離子峰分別為m/z338→296(利奈唑胺)和m/z295→267(內(nèi)標(biāo))碎片離子。
　　4、采用L

4、C-MS/MS方法，通過(guò)家兔耳緣靜脈給予適當(dāng)劑量的利奈唑胺，利用DAS軟件（版本2.0）對(duì)單劑量靜脈注射利奈唑胺后家兔的血漿藥物濃度-時(shí)間進(jìn)行擬合分析并根據(jù)藥物濃度-時(shí)間散點(diǎn)圖法、F檢驗(yàn)法和AIC判斷法綜合分析研究其藥代動(dòng)力學(xué)特征。
　　結(jié)果:
　　1、血漿中內(nèi)源性物質(zhì)對(duì)于內(nèi)標(biāo)物以及藥物含量的測(cè)定無(wú)干擾，血漿中利奈唑胺和內(nèi)標(biāo)物艾司唑侖的分離度良好，峰型尖銳、對(duì)稱(chēng)性好，兩者的保留時(shí)間穩(wěn)定，重復(fù)性良好。含量測(cè)定所建標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的線(xiàn)性

5、關(guān)系良好，檢測(cè)最低濃度為20ng/ml，定量下限的精密度小于15％，準(zhǔn)確度為94.6％;，利奈唑胺的準(zhǔn)確度在85％-115％之間;日內(nèi)精密度與日間精密度均小于10％;血漿樣品提取回收率（利奈唑胺和艾司唑侖）均達(dá)到90％以上;在室溫放置、冷藏放置、反復(fù)凍融以及長(zhǎng)期冰凍條件的回收率均可達(dá)到90％以上，且RSD％均小于10％，滿(mǎn)足生物樣品含量測(cè)定的要求。
　　2、對(duì)家兔耳緣靜脈注射利奈唑胺，通過(guò)對(duì)不同時(shí)間血漿中利奈唑胺濃度測(cè)定，利用DA

6、S軟件（版本2.0）對(duì)單劑量靜脈注射利奈唑胺后家兔的血漿藥物濃度-時(shí)間進(jìn)行擬合分析，得到利奈唑胺注射液在家兔體內(nèi)的各項(xiàng)藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)，t1/2為7.58±2.97小時(shí)，MRT(0-t)為2.60±1.12小時(shí)，MRT(0-∞)為4.60±2.77小時(shí)，CL為0.34±0.09升/小時(shí)，AUC(0-t)為9432.2±3156.2hng/mL，AUC(0-∞)為10097.8±3298.7。
　　結(jié)論:
　　1、建立了LC-M