減毒活菌卡介苗對支氣管哮喘小鼠Toll樣受體4表達和細胞因子水平的影響.pdf

1、目的：通過減毒活菌卡介苗干預支氣管哮喘小鼠，觀察支氣管哮喘小鼠支氣管肺泡灌洗液中細胞總數(shù)和嗜酸性粒細胞數(shù)量的改變以及病理切片中肺部炎癥情況，脾細胞培養(yǎng)上清液中IL-4、IL-5及IFN-γ細胞因子水平的改變，血清中IgE水平的變化，肺組織Toil樣受體4表達的變化，探討Toil樣受體4介導的減毒活菌卡介苗在支氣管哮喘免疫治療中的作用，為減毒活菌卡介苗的作用機制提供依據(jù)。 方法：昆明小鼠以卵白蛋白致敏激發(fā)建立哮喘模型并小劑量減毒活

2、菌卡介苗接種，最后一次抗原激發(fā)24小時內留取所需標本。收集支氣管肺泡灌洗液，計數(shù)支氣管肺泡灌洗液中細胞總數(shù)及嗜酸性粒細胞的數(shù)量。肺組織病理切片觀察哮喘小鼠肺組織炎癥情況及特征性嗜酸性粒細胞。制備脾細胞懸液，ELISA法檢測脾細胞培養(yǎng)上清液中IL-4、IL-5及IFN-細胞因子的含量。左心室采血，ELISA法檢測血清中IgE的含量。Western Blotting、免疫組織化學、RT-PCR檢測肺組織Toll樣受體4的表達。 結果

3、： (1)卡介苗觀察組小鼠支氣管肺泡灌洗液中細胞總數(shù)與嗜酸粒細胞數(shù)量與哮喘組小鼠相比明顯減少，肺組織病理切片顯示氣道炎癥明顯減輕。 (2)ELISA法檢測發(fā)現(xiàn)，卡介苗觀察組小鼠脾細胞培養(yǎng)上清液中IL-4、IL-5水平與哮喘組小鼠相比顯著降低，IFN-γ水平顯著上調，血清中IgE的水平顯著降低。 (3)Western Blotting、免疫組織化學以及RT-PCR技術檢測發(fā)現(xiàn)，卡介苗觀察組小鼠Toll樣受體4表達量

4、與哮喘組相比相對增強，與空白對照組相比顯著增強。 結論：減毒活菌卡介苗干預支氣管哮喘小鼠，通過上調Toil樣受體4的表達，啟動了Toll樣受體4的免疫調節(jié)機制，從而引起機體的Th1型免疫反應，脾細胞培養(yǎng)上清液中IL-4、IL-5水平顯著降低，IFN-γ水平顯著上調，其中IFN-γ是Th1型細胞因子，IL-4和IL-5是Th2型細胞因子，糾正了哮喘Th1/Th2失衡，減輕哮喘炎癥，小鼠支氣管肺泡灌洗液中細胞總數(shù)與嗜酸性粒細胞數(shù)減少