27288.染色質(zhì)重塑復合物亞基baf60a整合肝臟生物鐘與能量代謝的分子機制研究

1、學位論文獨創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所提交的學位是本人在導師指導下進行的研究工作和取得的研究成果。本論文中除引文外，所有實驗、數(shù)據(jù)和有關(guān)材料均是真實的。本論文中除引文和致謝的內(nèi)容外，不包含其他人或其它機構(gòu)已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果。其他同志對本研究所做的貢獻均已在論文中作了聲明并表示了謝意。學位論文作者簽名：日期：)41。。弘學位論文使用授權(quán)聲明研究生在校攻讀學位期間論文工作的知識產(chǎn)權(quán)單位屬南京師范大學。學校有權(quán)保存本學位論文的電子和紙質(zhì)文

2、檔，可以借閱或上網(wǎng)公布本學位論文的部分或全部內(nèi)容，可以采用影印、復印等手段保存、匯編本學位論文。學?？梢韵驀矣嘘P(guān)機關(guān)或機構(gòu)送交論文的電子和紙質(zhì)文檔，允許論文被查閱和借閱。(保密論文在解密后遵守此規(guī)定)保密論文注釋：本學位論文屬于保密論文，保密期限為年。學位論文作者簽名：日期：指導教師簽名：日期：暢川1WJ“未羽卿緲幻叫n口一o7摘要摘要哺乳動物的許多生理活動具有晝夜節(jié)律性，比如睡眠覺醒、血壓、血液激素水平以及能量代謝等都呈現(xiàn)出以24小

3、時為周期的波動。這些機體內(nèi)在的生物節(jié)律是由光線和飲食的周期變化所控制的。哺乳動物的生物鐘可分為中樞性和外周性兩大類，中樞性生物鐘位于下丘腦視交叉上核神經(jīng)元(suprachiasmaticnucleus，SCN)內(nèi)，它接受光線刺激并產(chǎn)生主要的時鐘信號，通過體液和神經(jīng)內(nèi)分泌通路傳遞到外周組織，來協(xié)調(diào)外周生物鐘。通常情況下，這兩大類生物鐘的運作是同步的，然而飲食行為的改變卻能夠重新設(shè)定外周生物鐘，使之與中樞生物鐘解偶聯(lián)，這說明營養(yǎng)信號在調(diào)節(jié)外

4、周性生物鐘中扮演了重要角色。近年來的研究證實，神經(jīng)內(nèi)分泌和代謝系統(tǒng)是受到精確節(jié)律控制的。在哺乳動物整個基因組中，大約有10％的基因呈現(xiàn)出晝夜節(jié)律性表達，其中很多基因編碼在代謝過程中起關(guān)鍵作用的酶。更重要的是，嚙齒類動物和人類的許多代謝活動也具有節(jié)律性，例如肝糖異生、膽酸合成以及肝臟的解毒過程。相反，生物鐘系統(tǒng)中的一些核心調(diào)控因子本身也具有重要的代謝調(diào)控功能。至今，關(guān)于生物鐘和能量代謝過程的整合機制遠未明了。2007年，《自然》雜志上報道

5、了PGC1a可以整合生物鐘與能量代謝。PGC1a(過氧化物酶體增殖物活化受體Y共激活因子1伐)是能量代謝的關(guān)鍵調(diào)控因子，它能夠和RORo【／7(視黃酸相關(guān)的孤兒受體0L／丫)協(xié)同作用，從而在轉(zhuǎn)錄水平上整合外周生物鐘和能量代謝兩大途徑。近期有研究報道，染色質(zhì)重塑復合物SWI／SNF家族成員之一—BAF60a，能和PGC1a相互作用，并且它能和PGC1a一起協(xié)同調(diào)節(jié)肝臟的脂代謝。BAF60是SWI／SNF復合物的一個亞基，該復合物能通過水解

6、ATP獲能來調(diào)節(jié)核小體和染色質(zhì)的結(jié)構(gòu)。有趣的是，BAF60a在肝臟內(nèi)也呈現(xiàn)晝夜節(jié)律性表達。我們設(shè)想BAF60a可能也參與到生物鐘和能量代謝的整合過程中去，因此我們進行了一系列實驗來驗證我們的假說。我們的實驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)BAF60a在肝臟內(nèi)確實呈現(xiàn)晝夜節(jié)律性表達，通過尾靜脈注射BAF60ashRNA的腺病毒干擾肝臟中BAF60a的表達后發(fā)現(xiàn)，一些重要的生物鐘和代謝基因的表達嚴重受損，并且血液中的一些代謝物的水平發(fā)生明顯改變。在細胞水平上，當B