生化檢驗質控方法之大全

1、1,生化檢驗質控方法之大全,質量控制（quality control，QC）是利用現代科學管理的方法和技術檢測分析過程中的誤差，控制與分析有關的各個環(huán)節(jié)，確保實驗結果的準確可靠。也稱為實驗室質量保證。,定義：,3,1947年Sundeman首先調查發(fā)現不同實驗室對同一份標本的實驗結果有驚人的誤差。 1950年Levey和Jennings就將工業(yè)質控圖移植臨床生化實 驗室，此后，質控圖和數理統計一直成為臨床生化檢驗質量

2、控制（QC）的重要手段。 1953年世界上出現了商品性的控制血清。 1954年發(fā)展到國與國之間的質量調查。 1960年代初已發(fā)展為全面質量控制。 1974年在日本召開了第一次臨床生化檢驗質量控制國際 專題討論會。 隨后WHO和國際臨床生化學會都設有質控領導機構，向各國提供標準品和控制物，領導和管理國際性的質量控制工作。,專業(yè)發(fā)展,4,主要內容 第一節(jié) 全過程質量控制

3、 第二節(jié) 室內質量控制 第三節(jié) 室間質量評價 第四節(jié) 實驗室認可 第五節(jié) 試劑盒的選擇和評價,5,第一節(jié) 全過程質量控制,全面質量控制的內容 ▼ 分析前質量控制 ▼ 分析中質量控制 ▼ 分析后質量控制,全面質量控制的內容主要包括標本分析前的質量保證、分析中的質量控制和分析后的質量評估

4、三個主要過程的質控。它們之間的實驗保證體系見圖4-1。,全面質量控制的內容,7,內容主要為： ① 人員的素質和穩(wěn)定性 ② 實驗室的設置和工作環(huán)境 ③ 實驗儀器的質量保證 ④ 檢測方法的選擇和評價 ⑤ 試劑盒的選擇與評價 ⑥ 病人準備 ⑦ 標本的采集、處理和儲存 ⑧ 實驗室用水等,（一）分析前質量控制,8,內容主要包括： ① 標本的

5、正確處理和應用 ② 項目操作規(guī)程的建立 ③ 室內質控和結果分析 ④ 登記和填發(fā)報告等,(二)分析中的質量控制,9,內容主要有： ① 運送實驗報告 ② 室內質控的數據管理 ③ 參加室間質評 ④ 病人投訴調查 ⑤ 臨床信息反饋等,（三）分析后的質量評估,10,圖4-1 全面質量控制實驗保證體系,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,

6、,,分析后質量評估,分析中質量控制,分析前質量保證,分析中質量控制,檢查病人申請檢驗,病人準備,標本采集,標本運送,人員素質工作環(huán)境實驗用水實驗室管理,臨床醫(yī)生,運送報告病人投訴室間質評,儀器質量保證方法選擇與評價試劑選擇與評價,反饋信息,標本處理,建立操作規(guī)程室內質控及分析標本分析測定,室內復查,保留標本隨時復查,登記填發(fā)報告,11,第二節(jié) 室內質量控制 臨床生化實驗室常規(guī)開展的室內質控（Int

7、ernal quality control，IQC），旨在檢測和控制常規(guī)工作的精密度和準確度，提高常規(guī)工作中天內和天間標本檢測的一致性。能及時地、準確地報告檢驗結果。,12,人員培訓 建立標準化操作規(guī)程 儀器的檢定與校準 質控品,一、室內質量控制的任務,13,實驗室每個工作人員都應對開展質量控制工作的重要性、基礎知識、一般方法有充分的了解，并在實踐過程中不斷學習、提高。每個實驗室都應培養(yǎng)一批開展質控工作

8、的技術骨干。,1．人 員 培 訓,14,標準化操作規(guī)程（standard operational procedure，SOP）包括儀器使用及維護的操作規(guī)程，試劑、質控品、標準品等使用的操作規(guī)程和每個檢驗項目的操作規(guī)程等。,2．建立標準化操作規(guī)程,15,對本實驗室的相關儀器如分光光度計、量具、自動生化分析儀以及其它測定儀器等要定期按要求進行檢定和校準如對自動化分析儀、分光光度計的摩爾吸收系數ε的定期校準。所有校準和檢定都應有時間、結果、變

9、更和頻度的記錄和說明。,3．儀器的檢定與校準,16,4．質控品,定義,為質控目的而制備的標本稱為質控品。質控品含有與測定標本同樣的基礎物質（通常為小牛血清）其分析物應具有參考值、病理值和醫(yī)學決定水平三種水平濃度。,17,,是指對臨床診治疾病具有決定性作用的被分析物的濃度，是臨床上按照不同病情給予不同治療方案而確定的閾值。,醫(yī)學決定水平,定義：,18,某一測定成分可有多個醫(yī)學決定水平。如血糖有四個決定水平。2.8mmol/L表示低于此值出

10、現低血糖癥狀，7.1mmol/L表示空腹時確定糖尿病的水平，8.9mmol/L表示出現尿糖，16.5mmol/L 以上出現高血糖昏迷。,特點：,19,根據質控品的物理性狀不同分為凍干質控品、液體質控品和混合血清等。根據有無測定值可分為定值（藍色標簽）質控品和非定值（紅色標簽）質控品。各實驗室可根據各自的情況選用以上一種質控品作為室內質控品。,質控品的種類,20,①人血清基質，分布均勻。 ②無傳染性。 ③添加劑和調制

11、物的數量少。 ④瓶間CV%酶類應小于2%，其它應小于1% 。 ⑤凍干品復溶后穩(wěn)定，2～8℃時不少于24小時，－20℃時不少于20天；某些不穩(wěn)定成分（如BIL，ALP等）在復溶后4小時的變異應小于2% ⑥在實驗室的有效期應在一年以上。 ⑦合理的成本。,質控品應具有的特征是：,21,①嚴格按質控品說明書操作。 ②凍干質控品的復溶要確保溶劑的質量。 ③凍干質控品復溶的

12、加量要準確一致。 ④凍干質控品復溶應輕輕搖勻切忌劇烈震搖。 ⑤質控品應按規(guī)定方法保存不用超期品。 ⑥質控品要與標本同樣測定條件下測定。,質控品的正確使用和保存,22,二、室內質量控制的主要方法,確定質量目標 設定靶值和控制限Levey-Jennings質控圖多規(guī)則質控技術,質量目標是實驗室選用的質控方法所需達到的目標，質量目標可用總允許誤差的形式表示．　　目前中

13、國尚未確立各項目的總允許誤差，可參考美國（表４-１）和歐洲（表４-２）．,一、確定質量目標,24,最佳變異(optimal conditions variance OCV)表示實驗室在最佳條件下測定項目所能達到的最好精密度水平。 常規(guī)變異(routine conditions variance RCV)表示實驗室在常規(guī)條件下測定項目所能達到的精密度水平。RCV2OCV時，不可接受．二者是反映實驗室工作水平的基礎指標，也是開展室內質控

14、工作的基礎工作。,最佳變異和常規(guī)變異的設定,25,1、穩(wěn)定性較長的質控品 ①暫定靶值的設定：對新批號的質控品進行測定，根據至少20次質控測定的結果，計算出平均值和標準差，作為暫定靶值和暫定標準差。 ②常用靶值的設立：以最初20個數據和三至五個月在控數據匯集的所有數據的累積平均數作為質控品有效期內的常用靶值和常用標準差。2、穩(wěn)定性較短的質控品3、特殊情況的處理,二、設定靶值和控制限,26,對新批號的質控品應確定控

15、制限，控制限通常是以多個標準差表示，即以標準差的倍數表示。不同項目（定量測定）的控制限要根據其采用的質控規(guī)則來決定。,4、設定控制限,27,1、均數－標準差（ -s）質控圖　是臨床最常用的質控圖，以監(jiān)測分析的精密度。均數－標準差（-S）質控圖,三、Levey-Jennings質控圖,根據前面確定的靶值（ ）和標準差繪制 -s質控圖，得到均值線（ ）、警告線（ ±2s）和失控線（ ±3s

16、）。與質控圖制作相同批號的控制血清，每天隨病人標本分析，結果點在圖上，直線連接。,（1）方法:,28,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,d,均數,+2S,-2S,+3S,-3S,正常分布,,29,正常分布規(guī)律： ① 95%數據落在 ±2s內 ② 不能有連續(xù)5次結果在同一側 ③ 不能有5次結果漸升或漸降 ④ 不能連續(xù)2個點落在 ±2s以外 ⑤ 不

17、應該有落在 ±3s以外的點,（2）結果分析：,30,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,趨勢變化,漂移,精密度變化,,-3S,+3S,+2S,-2S,d,2S,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,31,① 漂移，提示存在系統誤差。 ② 趨勢性變化，說明試劑或儀器的性能已發(fā) 生變化。 ③ 精度變化，提示測定的偶然誤差較大，如 儀

18、器、試劑不穩(wěn)定等。,異常表現:,32,（1) 方法： 要求在常規(guī)條件下，同時測定2份定值質控血清，并要求質控血清所含測定物濃度最好分別為醫(yī)學決定水平的上限（高值）或下限（低值），或者是分析方法測定范圍的上限和下限。將測定結果分別繪成2份不同濃度的 －s質控圖，當有一份質控血清測定值處于質控圖上2s～3s界限內，發(fā)出“警報”信號時，即應采用其余各條規(guī)則對質控圖進行全面檢查，若符合其中一條，就應把該批分析測定的結果判為“失控”。,2.

19、Westgard多規(guī)則質控法,33,① 12S警告規(guī)則：當2份質控血清中的任意1份測定值處于±2s～±3s界限內，為“警報”信號。② 13S規(guī)則：當2份質控血清中的任意1份測定值超過±3s界限，為“失控”。提示存在隨機誤差。,（2）判斷規(guī)則：,,,,,,,,,,,,,,,,2s,-2s,-3s,3s,x,,③ R4S規(guī)則：同一批中二個質控結果之差超出4s范圍，其中一個超出＋2s限值，另一個超出－2s限值，

20、為“失控”，屬隨機誤差過大。 ④ 22S規(guī)則：同批兩個質控品結果同方向超出±2s限 值，或同一質控品連續(xù)兩次質控結果超出±2s限值為“失控”，多由系統誤差造成。,34,,,,,,,,,3s2s,-2s-3s,3s 2sX-2s-3s,⑤ 41S規(guī)則：當1份質控血清的測定結果連續(xù)4次超過＋1s或－1s界限，或2份質控血清的測定結果同時連續(xù)2次超過＋1s或－1s界限時，為“失控”，一般由系統誤差所至。⑥

21、10 規(guī)則：當1份質控血清測定結果連續(xù)10次偏于均值一側時，或2份質控血清的測定結果同時連續(xù)5次偏于 一側時，為“失控”，是系統誤差所致。,35,,,,,,,,s,2S,3S,-s,-2s,-3s,,,,,,,,,,,s,-s,36,1、操作者在測定質控時，如發(fā)現質控數據違背了質控規(guī)則，應填寫失控報告單，對失控結果要進行回顧、分析是否人為錯誤操作等原因。2、重新測定一次，若在控，則說明是由于人為原因所致，若仍然失控，則應更換同

22、一批號另一瓶質控血清，若在控則說明是質控物變質或污染。,（三）失控后處理,質控品必須分裝、冷凍保存,37,3、如仍失控，取另外一個批號的質控物或定值血清，以同樣方法測定一次，如結果在控，提示前一批質控血清可能存在問題，認真查找質控變質原因，予以改正。4、如仍不在允許范圍內，則仔細檢查儀器各部分性能是否正確，若仍然失控，更換試劑，重新測定，如在控則可能由于試劑放置時間過長變質。5、如結果仍失控，則仔細檢查儀器各部分性能是否正常，包括光

23、路、水路、電路等系統，維修保養(yǎng)后重測。,范例一BUN結果偏高,解決方案： 1、換定標液，將朗道的定標液換成試劑本身的定質控做所有項目質控，然后用質控單獨做BUN項目質控后，BUN標液，結果仍偏高，排除定標液的本身問題。 2、用定標液做質控結果亦偏高，排除質控品問題。 3、先用結果降低。結論：試劑本身存在一定的系統誤差，可能項目之間存在交叉污染。解決辦法：更換試劑的位置，更換干燥棒，如不行則需更換不同廠家的試

24、劑。結果：更換試劑位置，結果恢復正常。,范例二 RF出現負值,可能原因分析：1、RF采用的是免疫比濁法，其測定的付波長為700nm，儀器在700nm處有很強的非特異性吸收峰，導致付波長吸收峰增高，當標本的濃度很低時，主波長的吸光度值比付波長的低，結果出現負值。2、定標液濃度較高，而比濁法不能用線性定標方式，必須采用多點定標的方法。低濃度時就很可能出現負值。3、抗原抗體反應出現后帶現象?？赡艿慕鉀Q方案：1、將檢測的付波長

25、去掉（可能會結果偏高，乳糜血的干擾）2、更換定標液3、稀釋。,39,40,41,42,43,44,45,第三節(jié) 室間質量評價,室間質量評價（external quality assessment，EQA）是指多家實驗室分析同一標本，由外部獨立機構收集、分析和反饋實驗室檢測結果，評定實驗室常規(guī)工作的質量，觀察實驗的準確性，建立起各實驗室分析結果之間的可比性。,46,①鑒定實驗室的工作缺陷（操作程序、制度）②建立方法的可接受限③鑒

26、定方法的可信性④為實驗室執(zhí)照評定或認可提供客觀依據⑤評價實驗室工作人員的能力⑥評價實驗室結果的可比性 目的是通過實驗室間的比對，觀察各實驗室結果的準確性、一致性，并采取一定措施，使各實驗室結果漸趨一致。,（一）室間質評的目的,47,（二）室間質評應具備的條件 ① 要有一支素質較高的質控技術隊伍 ② 室間質評要有室內質控的基礎 ③ 要有良好質控血清作為調查樣本 ④ 樣本定值方法可靠，有參考實驗室作后盾

27、 ⑤ 統一測定方法及校準品,48,1．方法 組織若干實驗室，共同在規(guī)定時間內測定同一批樣品、收集測定結果，作統計分析并按規(guī)定評分。,（二）室間質評的方法,49,能力比對分析（proficiency testing,PT）是室間質量評價技術方案之一，現已成為全球性室間質量保證系統的主要內容，以保護病人的利益和公眾的福利。 PT方案是通過實驗室之間的比對判斷實驗室的檢測能力的活動。 美國國會1988年臨床實驗

28、室修正案（Clinical laboratory improvement amendment,CLIA′88）強制性地將PT作為實驗室認可的主要內容之一。,能力比對分析,50,表4-3 美國CLIA’88能力比對檢驗對臨床化學的分析質量要求,51,52,國際CLIA′88的PT方案規(guī)定，臨床生物化學項目每年至少進行3次PT調查，每次調查至少包括5個不同的質控樣本，在一年內，對于任一項至少可得15個測定結果。通過各實驗室間持續(xù)的比較，作

29、出結果判斷。,（一）方法,53,針對某一項目的得分（Score）： S1 = 對調查的全部項目的得分： S2 =,（二）計算,54,國際CLIA′88技術細則規(guī)定，S1、S2均應大于80，否則判為不滿意。且如果S1或S2連續(xù)兩次或兩次以上不滿意，即為失敗，對于某一個接受結果，不再進行優(yōu)劣分級。,（三）判斷,55,PT是對實驗室常規(guī)工作進行評價的活動，目的是為了全面提高檢驗的

30、質量。 所以對PT調查的標本應完全按照病人標本一樣對待，與病人標本同時進行分析，切忌互相核對結果，這樣才能反映實驗室真正的日常工作水平。 各實驗室應該與PT組織者密切合作，解決實驗中出現的各種問題，不斷提高檢驗質量。,（四） 目的意義,1．目的,56,通過能力比對分析可獲得本實驗室與使用同一方法的其他實驗室結果的差異，以及與做同一試驗但使用不同方法的實驗室結果比較的情況。 能力比對分析還可評價實驗室的分析能力，監(jiān)控

31、實驗室可能出現的技術問題，可作為實驗室質量保證的外部監(jiān)督工具。,2．意義,57,變異指數得分法1985年全國臨床檢驗質量控制會議上通過的提案，建議變異指數得分計算公式如下： V = VI = 其中，Ｘ為各實驗室某項目的測定值，T為靶值，V為變異百分數，VI為變異指數，CCV為已選定的變異系數。,補 充,58,表

32、4-5 WHO推薦的CCV值,K+Na+Cl-Ca2+P3+Glu,2.91.62.24.07.87.7,5.77.78.93.97.59.6,BUNUACrTPAlbTBIL,判 斷 標 準,在計算時，VIS只計整數位，不帶正負符號。當VI ≤ 400時,VIS = VI; 當VI ＞ 400時，VIS = 400。,59,我國的標準為：VIS≤80為優(yōu)良80＜ VIS≤150為

33、及格VIS＞200，表明結果中有臨床上不允許的誤差。 VIS=400的測定結果會造成臨床的嚴重失誤，是絕對不許可的,WHO的標準為:VIS＜50為優(yōu)秀VIS＜100為良好VIS＜150為及格。,60,VIS方案過去運用的相當廣泛，但隨著科學的發(fā)展，已暴露出自身的不足，比如說酶、HDL、膽固醇等指標已成為當今實驗室的常規(guī)項目，但由于VIS方案還沒有給出它們的CCV值，所以無法計算VIS。而CCV值的確定是一個復

34、雜而漫長的過程，并需要隨著儀器的更新隨時進行調整，從而使VIS的計算值無法真正代表當前的實際水平。,VIS方案的評價,61,一、定義實驗室認可（laboratory accreditation）是由權威性專業(yè)組織按照一定的標準對實驗室或實驗室工作人員進行檢查、考核，認可能夠開展或勝任某些工作，并授予資格的過程。,第四節(jié) 實驗室認可,62,①認可委員會②一系列標準及檔案③經選拔和培訓并取得資格的評審員,二、基本組成,第五節(jié)臨床

35、生物化學實驗方法的選擇與評價,一、實驗方法的選擇二、實驗方法的評價三、臨床診斷實驗的性能評價,63,一、實驗方法的選擇,方法分級 1、決定性方法：準確度最高，系統誤差最小，經過詳細的研究，沒有發(fā)現產生誤差的原因或在某些方面不夠明確的方法。用于發(fā)展及評價 參考方法和標準品。 2、參考方法：指準確度和精密度已經充分證實的分析方法，干擾因素小，系統誤差小，有適當的靈敏度、特異性直線性及較寬的分析范圍。用于鑒定常規(guī)方

36、法和二級標準品。 3、常規(guī)方法：指性能符合臨床或其他目地的需要，有適當的分析范圍，而且經濟實用。,64,標準品的分級： 標準品：一種或幾種物理化學性質已經充分確定，被用于校準儀器或證實一種測定方法的物質。1、一級標準品：已經確定為穩(wěn)定而均一的物質，它的數值已經由決定性方法確定，或由高度準確的若干方法確定，所含雜質也已經定量，且有證書，用于校準決定性方法，評價及校準參考方法以及為二級標準品定值。2、二級標準品：這類標準品可

37、由實驗室自己配制或為商品，其中有關物質的量由參考方法定值，主要用于常規(guī)方法的標化或為控制物定值。3、控制物：控制物有凍干或是溶液，以參考方法用一級或二級標準品定值，用于質量控制，一般不用于標化。,65,一、實驗方法的選擇,實驗方法的選擇要求,66,1、實用性 2、可靠性 3、真實性,67,二、實驗方法的評價,評價實驗與分析誤差類型的關系,分析誤差的類型,評價實驗,初步實驗,指標,偶然誤差

38、 重復性實驗 精密度恒定誤差 干擾實驗 準確度比例誤差 回收實驗 準確度,三、診斷性試驗評價的相關指標,1.敏感度 2.特異度 3.陽性似然比 4.陰

39、性似然比 5.受試者工作曲線,三、臨床生物化學診斷實驗的性能指標,1、靈敏度 診斷實驗檢出的陽性病人的百分率 臨床靈敏度（%）= 實際上檢測為陽性病人數/理論上為陽性病人數2、臨床特異度 指診斷實驗檢查確定未患病的百分率 臨床特異度=檢查結果為陰性的人數/全部受檢未患病的人數,69,70,3、參考值：系指一個地區(qū)的健康

40、人群中，規(guī)定若干條規(guī)格標準，在總體中抽樣進行調查測定，將測定結果經統計學處理求出均值和標準差，通常將均值定為參考值，將X±2S定為參考范圍。,4、似 然 比（Likelihood ratio；LR）,似然比指的是患某種疾病的患者進行某種檢測所得的指定數值范圍內敏感度和特異度之間關系.陽性似然比：診斷實驗的真陽性率與假陽性率之比。PLR =敏感度/（1-特異度）陰性似然比：診斷實驗的假陰性與真陰性之比。

41、NLR=（1-敏感度）/特異度,5、ROC 曲 線,ROC曲線(Receiver OperatorCharacteristic curve)：真陽性率對假陽性率作圖。并將所對應的點連接起來所得到的曲線。,血糖測定及其sen與spe,,75,第六節(jié) 試劑盒的選擇和評價,本節(jié)主要內容生化檢驗試劑的發(fā)展

42、 試劑盒的選擇和評價,76,臨床生化試劑盒   臨床生化商品試劑與標準液按檢測項目組合成一套放在一個包裝盒內叫試劑盒（reagent kit），或叫試劑組合（r

43、eagent set ）。 與自動化分析儀匹配的試劑盒的研制、生產和供應走向產業(yè)化的道路，它無疑是臨床生化發(fā)展史上一個巨大的技術進步。,77,試劑盒的分類和發(fā)展,臨床生化診斷試劑種類繁多，有液體型、粉劑型、片劑型，有單一試劑、雙試劑、干試劑、多試劑等。 縱觀近20多年來的發(fā)展，臨床生化體外診斷試劑盒的分類和發(fā)展歷史可表示如下：,78,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,

44、,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,化學分析法,方法學 物理性狀 組合形式 操作方式,液體型自配試劑,液體多劑型試劑,手工法多步操作,酶法分析,干粉片型試劑,液體單劑型試劑,流動離心式分析儀,免疫學法,液體型商品試劑,液體雙劑型試劑,任選分立式分析儀,干化學法,干式多層膠片型試劑,單劑型干片式

45、試劑,干片式分析儀,79,（一）液體型試劑 優(yōu)點是液體型試劑的試劑組分高度均一，瓶間差異小，測定重復性好和使用方便；它也無需加入任何輔助試劑及蒸餾水，避免了外源性水質對試劑的影響，性能較穩(wěn)定，測定結果較為準確。 缺點是液體型試劑（尤其是酶試劑）保存時間較短，不便于運輸。,,一、液體型試劑和粉（片）劑型試劑,80,所謂液體單試劑就是將某種生化檢驗項目所用到的試劑科學地混合在一起，組成為一種試劑。應用時，只須將標本和試劑按一定比例混

46、合，即可進行相應的生化反應，然后用適當的方法檢測結果。,,1．液體單試劑,81,內源性甘油給甘油三酯測定的干擾。 內外源性NH4+對尿素酶法測定的干擾。 內源性丙酮酸對ALT、AST測定的干擾等。 維生素C和膽紅素對Trinder反應的干擾。,單試劑存在抗干擾能力差的缺點，給測定結果帶來相當大的分析誤差。例如：,82,所謂液體雙試劑就是將某些生化檢測項目所用到的試劑，按用途科學地分成兩類，分別配成兩種試劑，通常第一試劑加入后

47、可起到全部或部分消除某些內源性干擾的作用，第二試劑為啟動被檢測物質反應的試劑，兩種試劑混合后才共同完成被檢項目的生化反應。然后用適當的方法檢測結果。,,2．液體雙試劑,83,所謂粉劑型及片劑型試劑，即是將試劑的各組分用球磨技術粉碎成粉劑或混合后壓成片劑，使用前再加入指定的溶液復溶成液體試劑。,（二）粉（片）劑型試劑,84,用固體原料研磨后制成粉劑或片劑，則存在許多問題： ①要使試劑各組分混合得非常均勻，技術難度很大； ②分裝過程

48、中的稱量誤差及復溶時加水量的準確性影響試劑的瓶間差； ③水質優(yōu)劣對試劑的穩(wěn)定性和測定的可靠性有相當大的影響。,85,（一）檢查包裝是否完整（二）試劑質量初評 （三）試劑性能特征的評估,二、試劑盒的選擇和評價,86,（一）檢查包裝是否完整,商品試劑盒不僅應具有優(yōu)質的試劑內容，而且應有完整牢固的包裝和詳盡明確的說明書。,1、外包裝 外包裝應完整牢固，封口嚴密。,2、內包裝 內包裝應有清晰完整的標簽，牢固貼于容器

49、表面。,3、說明書 內容包括試劑名稱、用途、測定原理和技術要求、標本要求、衛(wèi)生部批準的文號等。,87,,一、說明書審查 說明書是用戶了解和正確使用試劑盒的指南。審查內容包括： ①試劑名稱； ②用途； ③測定原理和技術要求； ④試劑盒內的包裝內容； ⑤適用儀器；,88,,一、說明書審查 ⑥標

50、本要求； ⑦測定步驟及注意事項； ⑧貯存的條件及有效期； ⑨性能特征，包括準確度、精確度、特異性、 　受干擾的程度、線性范圍、參考范圍； ⑩生產單位名稱、地址、郵編及電話。,89,,（二）試劑質量初評,通過觀察試劑的顏色、性狀及溶解度等對試劑質量進行初步評價。粉劑型應均勻無凝塊，不粘附瓶壁；液體型試劑應無沉淀，無混濁，無滲漏。,90,,,（三）試劑性能特征的評估,（一）準確度

51、 （二）精密度（三）干擾物試驗 （四）線性范圍（五）穩(wěn)定性,91,,（一）測定準確度,1、通常用回收試驗來衡量試劑盒的準確度?；厥章试浇咏?00%，準確率越高，一般以100%±5%為合格。,2、也可以用對比試驗來衡量 ：將被檢試劑盒與公認的參考方法同時測定若干樣本，計算兩組結果的相關系數和直線回歸方程。 相關系數γ在0.9～1.0之間，斜率b越接近1.0，截距a越接近0，則準確度越

52、高（y=a+bx）。 b表示比例系統誤差，a表示恒定系統誤差。,92,,（二）檢驗精密度,,,試劑批內精密度和批間精密度均以變異系數來表示，一般批間CV值應大于批內，但二者應無顯著差異，否則，試劑盒的均一性不符合要求。 1．批內精密度 同一樣品用同一瓶試劑測定10次，求平均值、標準差、變異系數。 2．批間精密度 同一樣品，用不同批號的10瓶試劑測定，求平均值、標準差、變異系數。,93,（三）干擾物試驗

53、,通過試驗觀察試劑對干擾物影響的耐受程度。,方法 取一混合標本，從中分出幾份，分別加入不同以知量的干擾物，然后測定出不同干擾物濃度下的待測物量，比較其測定結果，從各自的偏差程度即可了解試劑對干擾物的耐受程度。,94,,,,（四）測定線性范圍,線性范圍指該試劑盒按其說明使用時可準確測量的范圍。 試劑盒的線性范圍應能覆蓋臨床上的參考值范圍和常見疾病的醫(yī)學決定水平，以減少樣品稀釋重測的機會。一旦線性范圍變窄即應廢棄。

54、造成線性范圍變窄的原因常見的有： ①生產中組份投料量不足； ②生產后組分穩(wěn)定性差； ③運輸和貯存不當等。,95,,,,（五）穩(wěn)定性試驗,試劑盒穩(wěn)定性是指試劑盒在規(guī)定條件下儲存仍保持其性能指標的期限。該期限應符合規(guī)定的儲存期。方法有以下三種。 1．原包裝試劑的穩(wěn)定性 按說明書的保存方法儲藏，于不同時期取出一瓶復溶，測定試劑吸光度值、標準品含量、定值血清含量、線性范圍、酶促反應時間曲線或化學反應速度時間曲線及其他

55、性能指標，直到這些指標變化超出規(guī)定值的10%以上的期限，為原包裝試劑的穩(wěn)定期。,96,2．復溶后試劑的穩(wěn)定性 將復溶試劑分別放在4℃、25℃保存，逐日與新復溶試劑對比，觀察上述指標（見原包裝試劑穩(wěn)定性），直到測定結果與新復溶試劑的差值>10%以上，這一期限為復溶后試劑的穩(wěn)定期。,3．不同溫度下的保存期 將原包裝試劑盒置25℃、37℃、45℃、4℃保存，以出現說明試劑變質的指標來確定在不同溫度下的保存期。,97,1、醫(yī)學決定水平