小菜蛾卵黃原蛋白基因的克隆、表達(dá)模式與功能分析

1、獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明，所呈交的學(xué)位（畢業(yè)）論文，是本人在指導(dǎo)教師的指導(dǎo)下獨(dú)立完成的研究成果，并且是自己撰寫的。盡我所知，除了文中作了標(biāo)注和致謝中已作了答謝的地方外，論文中不包含其他人發(fā)表或撰寫過的研究成果。與我一同對(duì)本研究做出貢獻(xiàn)的同志，都在論文中作了明確的說明并表示了謝意，如被查有侵犯他人知識(shí)產(chǎn)權(quán)的行為，由本人承擔(dān)應(yīng)有的責(zé)任。學(xué)位（畢業(yè)）論文作者親筆簽名：日期：論文使用授權(quán)的說明本人完全了解福建農(nóng)林大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位（畢業(yè)）論文的規(guī)

2、定，即學(xué)校有權(quán)送交論文的復(fù)印件，允許論文被查閱和借閱學(xué)?？梢怨颊撐牡娜炕虿糠謨?nèi)容，可以采用影印、縮印或其他復(fù)制手段保存論文。保密，在年后解密可適用本授權(quán)書。□不保密，本論文屬于不保密。□學(xué)位（畢業(yè)）論文作者親筆簽名：日期：指導(dǎo)教師親筆簽名：日期：目錄摘要...........................................................................................

3、...................................................IAbstract...........................................................................................................................................III1前言...............

4、...............................................................................................................................11.1昆蟲的生殖系統(tǒng)..................................................................................

5、..............................11.2昆蟲卵黃原蛋白（vitellogenin，Vg）.............................................................................41.2.1昆蟲卵黃原蛋白（Vg）概述..................................................................

6、..............41.2.2昆蟲卵黃原蛋白（Vg）的分子結(jié)構(gòu)與特性........................................................61.2.3昆蟲卵黃原蛋白（Vg）的合成、轉(zhuǎn)運(yùn)與攝取....................................................81.3昆蟲卵黃發(fā)生與卵子形成................................

7、..............................................................101.4昆蟲卵黃原蛋白（Vg）的功能研究..............................................................................111.5本研究的總體思路..............................................

8、............................................................122材料與方法.................................................................................................................................142.1材料、試劑及儀器..........

9、................................................................................................142.1.1供試?yán)ハx...............................................................................................................14

10、2.1.2試劑及試劑盒.......................................................................................................142.1.3主要儀器...............................................................................................

11、................142.2實(shí)驗(yàn)方法..........................................................................................................................142.2.1小菜蛾卵巢解剖...........................................................

12、........................................142.2.2小菜蛾Vg基因的克隆與生物信息學(xué)分析........................................................152.2.2.1引物設(shè)計(jì)......................................................................................

13、..............152.2.2.2小菜蛾總RNA提取.................................................................................162.2.2.3cDNA第一鏈的合成................................................................................162.2.2.

14、4PCR擴(kuò)增目的片段...................................................................................172.2.2.5DNA純化回收..........................................................................................182.2.2.6平末端連接.......

15、.........................................................................................182.2.2.7Vg基因生物信息學(xué)分析..........................................................................192.2.3Vg基因表達(dá)模式分析....................

16、.....................................................................192.2.3.1熒光定量PCR引物的設(shè)計(jì)......................................................................192.2.3.2小菜蛾樣品準(zhǔn)備............................................

17、............................................202.2.3.3實(shí)時(shí)熒光定量PCR...................................................................................202.2.3.4數(shù)據(jù)分析..............................................................

18、......................................212.2.4Vg基因功能驗(yàn)證.................................................................................................212.2.4.1siRNA的制備.....................................................