大劑量粒細胞集落刺激因子治療急性放射病的實驗研究.pdf

1、目前在急性放射病臨床救治工作中，細胞因子特別是造血細胞生長因子的應(yīng)用使得重度以下骨髓型急性放射病病人得以長期活存。在更大劑量照射條件下，盡管應(yīng)用了骨髓或外周血造血干細胞移植等先進治療手段暫時恢復了病人的造血功能，但極重度骨髓型急性放射病人目前仍無一例長期植入的。致死性射線損傷能否恢復以及恢復的程度主要取決于機體造血和免疫兩大系統(tǒng)的功能是否重建以及重建的程度，而造血細胞生長因子促進急性輻射損傷后造血功能的重建依賴于照射后患者體內(nèi)是否殘留有

2、造血干/祖細胞以及殘留造血干/祖細胞的質(zhì)量。若骨髓型急性放射病患者體內(nèi)仍殘留有一定數(shù)量且功能正常的造血干細胞，即可使用造血細胞生長因子刺激其增殖分化，恢復病人自身造血功能，而不需要進行造血干細胞移植，從而可避免因保證造血干細胞成功植入和/或防治移植物抗宿主病所用的大劑量免疫抑制劑而導致急性放射病患者消化、呼吸功能紊亂和皮膚損傷加重，甚至嚴重的真菌和/或病毒感染，進而導致多臟器功能不全甚至衰竭(MOF)的風險。因此，對于有造血干細胞殘留的

3、重癥骨髓型急性放射病患者，使用造血細胞生長因子治療可能比使用造血干細胞移植更為有利。為探討大劑量重組人粒細胞集落刺激因子治療重癥骨髓型急性放射病的可能性，我們對8.0Gy 60Co γ射線照射C57 BL/6小鼠及10.0Gy 60Co γ射線照射恒河猴進行了基于造血細胞因子方案的實驗治療研究，以期為重癥骨髓型急性放射病的臨床救治提供新的治療措施。
　　 本研究應(yīng)用大劑量rhG-CSF治療8.0Gy 60Co γ射線致死性照射所

4、致的急性放射病小鼠模型，觀察了經(jīng)治療后長期存活小鼠造血和免疫系統(tǒng)各指標的遠后恢復情況。結(jié)果發(fā)現(xiàn)增加rhG-CSF給藥劑量可以顯著提高致死劑量照射小鼠的存活率。照射后30d內(nèi)照射對照組小鼠全部死亡，死亡動物平均活存天數(shù)為12.1±3.0d。而大劑量rhG-CSF(1000μg/kg)可以使8.0Gy 60Co γ射線照射小鼠30d存活率提高86.7％(vs0％)，300d時存活率80％。照射40d以后可以觀察到大劑量射線照射活存鼠毛色變灰

5、繼而全身灰白。外源性脾結(jié)節(jié)數(shù)、造血祖細胞培養(yǎng)、外周血細胞計數(shù)及相關(guān)臟器病理組織學觀察等結(jié)果表明，大劑量rhG-CSF治療組活存300d小鼠造血系統(tǒng)仍然沒有完全恢復到同批隨養(yǎng)的正常鼠水平；外周血淋巴細胞亞群和脾臟T/B細胞增殖能力及胸腺脾臟臟器系數(shù)等免疫指標測定結(jié)果顯示仍存在不同程度的病變。但是大劑量rhG-CSF治療組小鼠造血以及免疫系統(tǒng)各指標恢復程度均遠好于小劑量rhG-CSF(250μg/kg)治療組。在照射小鼠實驗治療基礎(chǔ)上，我們

6、觀察了大劑量rhG-CSF(200μg/kg)對10.0Gy 60Co γ射線照射恒河猴的治療作用。研究發(fā)現(xiàn)大劑量rhG-CSF可以使10.0Gy 60Co γ射線照射恒河猴活存，30d存活率可達60％，而照射對照組兩只動物分別在照后12d和15d死于腸道或心臟出血。外周血象檢測結(jié)果顯示大劑量rhG-CSF可以顯著升高10.0Gy 60Co γ射線照射恒河猴外周血小板、網(wǎng)織紅細胞以及中性粒細胞數(shù)，促進治療猴外周血CFU-GM的生成，促進

7、造血功能恢復。同時大劑量rhG-CSF高效的動員作用，不僅可以為各系造血細胞的更新增殖提供種子，還為造血系統(tǒng)的全面恢復提供了可能性。
　　 本研究發(fā)現(xiàn)大劑量rhG-CSF照射后0.5和24小時兩次給藥方案可明顯促進10.0Gy照射恒河猴造血功能恢復，主要為升高外周血白細胞、中性粒細胞、網(wǎng)織紅細胞和血小板數(shù)；大劑量rhG-CSF還可將照射動物體內(nèi)殘留干/祖細胞動員到外周血并再“歸巢”，經(jīng)過這樣的自體干細胞遷移過程有利于干細胞“自發(fā)